[发明专利]一种联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒

权利要求书

1.一种联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于由包被有NSE、CYFRA21-1和DKK1单克隆抗体的多孔板，辣根过氧化物酶标的NSE、CYFRA21-1和DKK1，显色底物TMB和底物终止液组成；所述多孔板每孔包被NSE单克隆抗体1~4ug/mL；每孔包被CYFRA21-1单克隆抗体1~2ug/mL；每孔包被DKK1单克隆抗体1~2ug/mL，NSE、CYFRA21-1、DKK1三种检测性抗体按4:4:2比例加入酶标板孔中，总体积为100 uL。

2.根据权利要求1所述的联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于所述多孔板中，每孔的包被液为100uL。

3.根据权利要求1所述的联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒，其特征还在于所述辣根过氧化物酶标的NSE、CYFRA21-1和DKK1的工作浓度稀释倍数均为1:500~1:2500。

4.根据权利要求1所述的联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒，其特征还在于酶结合物保护液由0.01mol/L、pH7.4的磷酸盐缓冲液稀释得到，所述磷酸盐缓冲液中含0.1%的牛血清白蛋白和0.1%的硫柳汞。

5.权利要求1~4中任意一条权利要求所述联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：制备包被有NSE、CYFRA21-1、DKK1单克隆抗体的多孔板；用pH 8~10碳酸盐缓冲液将NSE、CYFRA21-1、DKK1单克隆抗体稀释，然后将上述NSE、CYFRA21-1、DKK1单克隆抗体稀释液加入到孔中；37℃包被1h，将5%牛血清白蛋白溶液加入到酶标板各孔，37℃封闭1 h；封闭后用磷酸盐缓冲液洗版拍干，将其保存于4℃。

6.权利要求1~4中任意一条权利要求所述联合检测肿瘤标志物的酶联免疫检测试剂盒在肿瘤相关标志物的检测中的应用。