[发明专利]一种低通读率慢病毒载体及方法无效
| 申请号： | 201110385184.4 | 申请日： | 2011-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN102533863A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 曾溢滔;张敬之;方彧聃;孙凤强 | 申请（专利权）人： | 上海市儿童医院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 200040 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通读 病毒 载体 方法 | ||
1.一种低通读率慢病毒载体，其特征在于，其为在慢病毒载体的3’LTR的U3区插入了cHS4的400bp核心序列和SV40的2×USE两种元件中的任何一种或两种。
2.如权利要求1所述的低通读率慢病毒载体，其特征在于，所述的cHS4的400bp核心序列和/或SV40的2×USE在U3区的插入位置是U3区的两个EcoRV酶切位点之间。
3.如权利要求1或2所述的低通读率慢病毒载体，其特征在于，插入的片段是反向接入的cHS4元件和/或正向接入的2×USE元件。
4.如权利要求3所述的低通读率慢病毒载体，其特征在于，所述的插入的片段是5’方向至3’方向依次为反向接入的cHS4元件和正向接入的2×USE元件。
5.如权利要求1所述的低通读率慢病毒载体，其特征在于，所述的慢病毒载体是慢病毒载体FUGW。
6.一种降低慢病毒载体通读率的方法，其特征在于，包括在慢病毒载体的3’LTR的U3区插入cHS4的400bp核心序列和SV40的2×USE两种元件中的任何一种或两种。
7.一种用于试验慢病毒3’LTR元件通读率的载体，其特征在于，其在EGFP-N1质粒的CMV启动子和GFP之间插入了3’LTR元件，并且在3’LTR元件的U3区含有cHS4和2×USE两种元件中的一种或两种。
8.如权利要求1所述的用于试验慢病毒3’LTR元件通读率的载体，所述的cHS4的400bp核心序列和/或SV40的2×USE在U3区的插入位置是U3区的EcoRV酶切位点。
9.如权利要求1所述的低通读率慢病毒载体在转基因中的应用。
10.一种RNA水平检测通读率的方法，其特征在于，包括采用RT-PCR定量通读mRNA和总mRNA拷贝数，将通读mRNA拷贝数除以总mRNA拷贝数即得通读率。
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