[发明专利]一种卵巢癌个体化治疗的检测试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种卵巢癌个体化治疗检测剂及其在卵巢癌检测中的应用。具体地，涉及卵巢癌个体化治疗，包括发生发展、分期分级、预测疗效等相关分子标志物检测探针的制备。本发明中涉及的卵巢癌分子标志物检测探针可用于指导卵巢癌个体化治疗方案制定，评价治疗效果、监测复发和转移、评估预后等。

背景技术

卵巢癌是发生于卵巢组织的恶性肿瘤，发病率仅次于宫颈癌和子宫体癌，占女性恶性肿瘤的第3位。由于卵巢肿瘤位于盆腔内，在患病的初期少表现症状，发病隐匿、进展迅速，70％～80％的卵巢癌患者发现时已为晚期，5年生存率仅为20％～30％，而早期卵巢癌患者的生存率可达90％。目前，临床普遍开展以手术为主的综合治疗，但因病理分类多，结构复杂，生物学特性区别大，且对化疗、放疗等的敏感性各异，造成处理上的困难而影响疗效，其死亡率超过宫颈癌和子宫体癌之和，占妇科肿瘤的首位。因此，只有提高卵巢癌的早期诊断水平、掌握各类型卵巢恶性肿瘤的生物特性，探索有效的综合疗法，才能够争取有利的治疗时机，改善预后，提高卵巢癌的生存率、降低死亡率。

与大多数恶性肿瘤一样，卵巢癌的演进及恶化也是一个多步骤、多因素参与的复杂过程，可能涉及到多个基因的共同调节。与卵巢癌相关的肿瘤标志物随着免疫学、分子生物学的发展，也得到了越来越深入研究，并在卵巢癌临床诊断和治疗中起到重要作用。大量的临床对比及回顾研究发现，有多个基因与卵巢癌相关。如BRCA1基因变异患卵巢癌比例更高，BRCA1与P53在上皮性卵巢癌中的表达呈负相关关系，两者可能在卵巢癌的发生、发展过程中存在相互协同作用，共同促进卵巢癌的演变及恶化(Zhihui Feng，Lisa Kachnic，Junran Zhang，et，al.DNA Damage Induces p53-dependent BRCA1 Nuclear Export.The Journal of Biological Chemistry，July 2，2004.279.28574-28584.)。RAD51C基因缺陷在卵巢癌中比例更高，ZNF361、PSMA2、AIB1在卵巢癌中高表达，ZNF217与卵巢癌显著相关，导致卵巢癌的发生发展，WT1基因在上皮性卵巢癌中高表达，与肿瘤分期分级相关，PTEN在卵巢癌发展中表达量逐渐下降，等等。

靶向治疗作为一种新的肿瘤治疗手段，能够提高药物对肿瘤细胞的杀伤力，而同时减少对正常组织器官的不良作用，较传统治疗方式显示出明显优势，已逐步应用于临床治疗。随着分子生物学、免疫学、病毒学和基因工程等基础学科的飞速发展，以及人们对肿瘤发生发展研究的深入，靶向治疗已作为一种新的治疗模式以其安全、高效的特性，为卵巢癌的治疗开创了新的领域，成为继手术、放疗、化疗后的又一种有希望的治疗方法，成为当今卵巢癌治疗的新趋势。而研究显示不同治疗方案和药物疗效存在明显的个体差异，利用分子生物学检测评估患者，据分子分型制定治疗方案，实行个体化诊疗，对于提高诊疗效果，降低死亡率、减少医疗成本都极具意义(Albertson，D.G.，2006.Gene amplification in cancer.Trends Genet.22(8)，447-455.Albertson，D.G.，Collins，C.，McCormick，F.，Gray，J.W.，2003.Chromosome aberrations in solid tumors.Nat.Genet.34(4)：369-376.Ena Segota MD，Ronald M，Bukowski MD：The promise of targeted therapy：Cancer drugs become more specific.Cleveland Clinic Journal Of Medicine 2004；volume71，number 7.)。目前，与卵巢癌相关的遗传标志、发生发展相关基因及用药疗效预测基因研究较多，但大多停留在试验室研究阶段，市场上缺少相应的分子诊断试剂，大大限制了个体化诊疗的发展。

本发明根据临床研究结果，选择与卵巢癌疾病进程及疗效预测两方面相关的分子指标作为检测靶点，通过联合检测在卵巢癌中的表达预测肿瘤生物学行为特征，并作为判断预后的指标，临床上可以通过对这些基因及其表达产物的监测而调整化疗方案。具体包括如下：