[发明专利]一种制备转基因猪精子的方法无效
| 申请号： | 201110385565.2 | 申请日： | 2011-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN102559751A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 孙金海;吴明明;崔海信;李奎 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;A61D19/02;A01K67/027 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 转基因 精子 方法 | ||
1.一种制备转基因猪精子的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将新鲜猪精液放置到16-18℃冰箱中平放保存，每7-9个小时轻轻翻转精子，防止精子沉淀；
(2)每80mL精液里面加入500-700微升聚乙烯亚胺(PEI)包裹的氧化铁磁性磁性纳米颗粒液体材料和500-700微升的浓度为500-800μg/ml质粒载体，轻轻混匀，然后室温孵育，每15-25min轻轻翻转1-10次，孵育80-100min得到转基因猪精子。
2.根据权利要求1所述的制备转基因猪精子的方法，所述的质粒载体是pEGFP-N1-pGH载体。
3.根据权利要求1或2所述的制备转基因猪精子的方法，所述的磁性纳米颗粒是Chemicell公司生产的PolyMAG-1000。
4.权利要求1-3任意一项所述的方法制备的转基因猪精子在制备转基因猪中的用途，其特征在于将转基因猪精子通过人工授精的方法给予母猪，所述的人工授精方式优选是非外科手术方式的。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于人工授精是通过注射来实现的。
6.根据权利要求4所述的用途，其特征在于所述的转基因猪精子是新鲜制备的。
7.根据权利要求4-6任意一项所述的用途，制备转基因猪的用途是非治疗目的和/或非诊断目的的。
8.一种制备转基因猪的方法，其包括权利要求1-3任意一项所述的转基因猪精子的制备方法，其特征在于将转基因猪精子通过人工授精的方法给予母猪，所述的人工授精方式优选是非外科手术方式的。
9.根据权利要求8所述的制备转基因猪的方法，其特征在于人工授精是通过注射来实现的。
10.根据权利要求8所述的制备转基因猪的方法，其特征在于所述的转基因猪精子是新鲜制备的。
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