[发明专利]一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201110386427.6 申请日: 2011-11-28
公开(公告)号: CN102433341A 公开(公告)日: 2012-05-02
发明(设计)人: 王克坚;曲海东;陈贝 申请(专利权)人: 厦门大学
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/46;C07K1/22
代理公司: 厦门南强之路专利事务所 35200 代理人: 马应森
地址: 361005 *** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 石斑鱼 抗菌 表达 产物 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.EC-hepcidin3前体肽的基因序列如序列表第1序列所示。

2.EC-hepcidin3前体肽的氨基酸序列如序列表第2序列所示。

3.重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

1)构建重组表达载体;

2)将步骤1)所得重组表达载体导入宿主细胞,获得可表达EC-proHep3的基因工程菌菌株;

3)发酵培养已得到的基因工程菌菌株并进行诱导表达,获得表达产物;

4)分离纯化步骤3)所得的表达产物,获得重组蛋白EC-proHep3。

4.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤1)中,所述表达载体为pET-28a+

5.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤2)中,所述宿主细胞为大肠杆菌E.coli Rosette。

6.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤3)中,所述表达产物为先通过离心收集表达菌体,将表达菌体重悬并超声破碎后再离心收集得到的上清液。

7.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤4)中,所述分离纯化采用亲和层析法纯化。

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