[发明专利]一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法有效
申请号: | 201110386427.6 | 申请日: | 2011-11-28 |
公开(公告)号: | CN102433341A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
发明(设计)人: | 王克坚;曲海东;陈贝 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/46;C07K1/22 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 石斑鱼 抗菌 表达 产物 及其 制备 方法 | ||
1.EC-hepcidin3前体肽的基因序列如序列表第1序列所示。
2.EC-hepcidin3前体肽的氨基酸序列如序列表第2序列所示。
3.重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)构建重组表达载体;
2)将步骤1)所得重组表达载体导入宿主细胞,获得可表达EC-proHep3的基因工程菌菌株;
3)发酵培养已得到的基因工程菌菌株并进行诱导表达,获得表达产物;
4)分离纯化步骤3)所得的表达产物,获得重组蛋白EC-proHep3。
4.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤1)中,所述表达载体为pET-28a+。
5.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤2)中,所述宿主细胞为大肠杆菌E.coli Rosette。
6.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤3)中,所述表达产物为先通过离心收集表达菌体,将表达菌体重悬并超声破碎后再离心收集得到的上清液。
7.如权利要求3所述的重组蛋白EC-proHep3的制备方法,其特征在于在步骤4)中,所述分离纯化采用亲和层析法纯化。
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