[发明专利]测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及定量测定制剂中维生素E含量的方法，具体地说是一种测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量的方法。

背景技术

国内对用HPLC法测维生素E预混剂中微生素E的含量的研究较多，但对亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量测定的液相方法研究较少。测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E的含量的常用方法为气相方法，2010版中华人民共和国药典有详细的描述。

目前，亚硒酸钠维生素E注射液都是以亚硒酸钠和DL-α-生育酚油状原料和适宜的辅料配制而成，用于防治动物的各种维生素E缺乏症。目前2010版《中国兽药典》亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量测定主要为气相色谱法，但由于气相色谱法操作复杂，重现性不好，检测时间长，经试验，高效液相色谱法测定亚硒酸钠维生素E中维生素E的结果准确可靠，且操作简便、快速，使标准的适用性更强。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量的方法，该方法属于HPLC法，具有操作简便、准确、重复性好、专属性强等特点。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量的方法，该方法属于HPLC法，其色谱条件为：

（1）色谱柱Welchrom -C₁₈（250mm×4.6mm，5μm）；

（2）流动相为混合比例（体积比）为2：98的水和甲醇；

（3）紫外检测器的检测波长为285nm。

作为本发明的一种限定，该HPLC法测定亚硒酸钠维生素E注射液中维生素E含量的方法，其色谱条件为：所用流动相的流速为1.2mL/min，进样体积为20μL，柱温为35℃。

本发明方法的建立过程：

1、仪器与试剂

仪器：岛津LC-2010A高效液相色谱仪（LC-2010型号检测器，LC-2010型号泵，LC-2010柱温箱，LC-2010自动进样器），LCsolution色谱工作站 ；

试剂：甲醇（色谱纯），水（二次去离子水），亚硒酸钠维生素E注射液（样品，河北科星药业有限公司生产），维生素E对照品（中国药品生物制品检定所批号100062-200608，含量为98.8%）。

2、含量测定方法的建立

2.1、波长的选择

根据维生素E紫外光吸收具有的特性，测定了它的甲醇溶液在紫外光下的吸收图谱，维生素E的检测波长选用285nm。

2.2、溶液的配制

溶剂为甲醇。

对照品溶液的配制：精密称取维生素E对照品100mg置于100mL的棕色容量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液M。

样品溶液的配制：精密量取样品2mL（约相当于维生素E 100mg）置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得样品溶液D。

2.3、溶剂、空白辅料的干扰性试验和维生素E的定性

 为排除色谱图中有溶剂和空白辅料干扰维生素E峰的出现，对单独的溶剂和空白辅料进行专属性试验，以增加检测的准确性。

溶剂的影响：取溶剂甲醇过滤，作为样品N。

空白辅料的影响：按配方量除维生素E外，亚硒酸钠和其他辅料按工艺制成100mL样品溶液，作为空白样品1。精密量取此空白样品1，2.00mL置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得，作为样品F。

照上述色谱条件进样，分别取样品N和样品F各20μL，进样，记录色谱图，见图1和图2。

结果显示：由图1可以看出检测结果接近于基线没有干扰峰出现，表明溶剂对维生素E的测定没有影响。由图2可以看出没有干扰峰出现，表明空白辅料和亚硒酸钠对维生素E测定结果没有影响。

维生素E的定性：取2.2项下的对照品溶液M 20μL，按照上述色谱条件进样，记录色谱图，如图3所示；取2.2项下的样品溶液D 20μL，按照上述色谱条件进样，记录色谱图，如图4所示。

说明样品溶液的色谱图中维生素E与对照品溶液的色谱图中维生素E保留时间一致。

2.4、样品的测定