[发明专利]预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性的方法和试剂盒

说明书

技术领域

 本发明涉及一种预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性的方法和试剂盒，特别涉及一种通过测定子宫内膜癌患者AP-2α基因单核苷酸多态性位点rs1045385基因型来预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性的方法和试剂盒，属于医学生物技术和基因诊断领域。

背景技术

子宫内膜癌，又称为子宫体癌，是妇科常见的恶性肿瘤。子宫内膜癌的治疗以手术治疗为主，化学治疗（化疗），是子宫内膜癌的辅助治疗方式。近年来化疗在子宫内膜癌治疗中的价值越来越受到重视。化疗不仅用于晚期患者的姑息治疗和有严重内科并发症、高龄等不宜手术治疗的病例，而且用于手术病理分期后具有高危因素者的辅助治疗或手术切除范围不足的补充治疗。术后化疗可降低早期子宫内膜癌患者的远处转移率，使死亡风险降低。

本发明涉及到的AP-2α基因是AP-2转录因子家族中的一个重要成员。AP-2基因家族在胚胎发育，细胞分化和肿瘤发生方面都有重要的调控作用，现在已鉴定属于该家族的成员有AP-2α、AP-2β、AP-2γ、AP-2δ和AP-2ε。近来，越来越多的研究表明，AP-2α不仅是胚胎发育过程中的一个重要调控因子，而且参与肿瘤发生发展过程。AP-2α调控许多参与细胞生长和凋亡的基因，从而抑制肿瘤的生长和肿瘤转移。AP-2α蛋白在肿瘤细胞中表达水平与化疗敏感性有关，AP-2α蛋白表达高的患者(肿瘤细胞)对顺铂、依托泊苷、紫杉醇、阿霉素、吉西他滨等化疗药物敏感，反之，AP-2α蛋白表达低的患者(肿瘤细胞)对这些化疗药物有耐药性（Wajapeyee N等，Cancer Res 2005;65:8628-8634; Jonckheere N等，Br J Cancer 101: 637-644.）。

MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA 分子，它通过不完全互补结合到目标靶mRNA 3′非翻译区（UTR）上并阻止目标基因的表达。miRNA在细胞分化、生物发育及疾病发生发展过程中发挥巨大作用，越来越多的引起研究人员的关注。许多研究发现miRNA-200家族（包括miR-200b, miR-200c, miR-429,以下统称为miR-200b/200c/429）在许多癌（尤其子宫内膜癌）组织中的表达显著高于相应的正常组织，而且miR-200b/200c/429在癌细胞中的高表达导致细胞对化疗药物敏感性降低(Lee JW等，Genecol Oncol,2011:120:56-62; Hamano R等，Clin Cancer Res, 2011,17:3029-3038)。

单核苷酸多态性（SNP）是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，它是人类可遗传的变异中最常见的一种。目前，已有研究表明个体对药物的反应、疾病易感性等都与SNP相关（许玲等，世界消化杂志，2005,13:592-595）。因此，研究SNP位点与肿瘤患者耐药性的关系可以为个性化用药和预后判断提供指导作用。目前已有通过检测SNP位点预测癌症、高血压继发性左心室肥厚、脑卒中等疾病易感性的方法（专利号ZL200910043021.0，ZL200710064639.6，ZL200810102698.2）,但尚未有通过检测单核苷酸多态性位点预测癌症患者对化疗药物敏感性的方法。

发明内容

 本发明的目的有两个：一是提供一种预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性的方法，用于弥补目前通过检测单核苷酸多态性位点预测癌症患者对化疗药物敏感性方面的空白；二是提供一种预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性的试剂盒，用于实际预测子宫内膜癌患者对化疗药物敏感性。

本发明公开的预测子宫内膜癌患者对化疗药物的敏感性的方法，通过检测子宫内膜癌患者的AP-2α基因单核苷酸位点rs1045385的基因型来实现预测。

    所述的检测子宫内膜癌患者AP-2α基因单核苷酸多态性位点rs1045385基因型的方法，在PCR扩增与测序时使用的引物碱基序列为：正向引物5′-GGGACTGAGTCACCACCTTC- 3′； 反向引物5′-GAATCGTGTTGCCAGAGAAAG- 3′。

一种用所述的引物制成的预测子宫内膜癌患者化疗药物敏感性的试剂盒，该试剂由下列试剂混合而成：