[发明专利]唑吡坦分子印迹固相萃取小柱

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于生物样品中唑吡坦分析前处理的工具和方法，尤其涉及一种用于固相萃取法进行唑吡坦前处理的萃取小柱和方法。

背景技术

唑吡坦（又称为“思诺思”），化学名为N,N,6-三甲基-2-(4-甲基苯基)-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-乙酰胺，一般制成酒石酸盐，是一种具有咪唑吡啶结构的非苯二氮卓类的新型镇静安眠药，通过选择性地与中枢神经系统ω1-受体亚型的结合，产生药理作用，用于治疗短期失眠症，0.5~3h后血药浓度达到峰值，生物利用度为70%。由于唑吡坦具有快速催眠作用，并能够导致一定程度的失忆，经常被不法分子利用，近年来，在法医毒物分析工作中涉及唑吡坦的案件呈日益上升趋势，常见的案件有麻醉抢劫、强奸等。联合国麻醉药品委员会第44届会议通过决议，决定将唑吡坦列入精神药物管制；2001年5月9日，国家药品监督管理局发出通知，将唑吡坦纳入精神药品管理。因此，唑吡坦的法医毒物分析具有非常重要的现实意义。

法医毒物分析主要针对涉及法律问题的生物检材或其他检材中毒药物的分离与鉴定，其基本任务是鉴定所送样品是否是毒药物、分析检材中是否含有某种或某几种毒药物、对已定性毒药物进行含量测定，通常需要从大量检材中分离出微量甚至痕量的毒物，并对其进行定性鉴别或定量测定，为确定是否中毒或中毒致死提供证据。目前对于唑吡坦的前处理方法主要有液-液提取、固相萃取法等；液-液提取法如何金海等人2009年在互联网公开的《串联质谱法检验尿液中的唑吡坦成分》一文中，采用液-液提取法提取后，GC-MS/MS法进行分析，但是液-液提取法特异性不强，杂质干扰多，有机溶剂用量大；固相萃取法如张蕾萍等人在《固相萃取-气相萃取色谱法分析全血中的唑吡坦》（刑事技术，2010年第2期）中公开了的固相萃取柱提取后，采用气相色谱法进行分析，而固相萃取法虽然杂质少、但其提取回收率不高，且耗时、成本高。

由于检材具有一次性、并且数量有限的特点，无法多得，而且不可能再次复得，再加上唑吡坦半衰期短、代谢快，因此我们需要特异性强、简便快速、成本低的新型方法进行唑吡坦的生物样品的分离提取。

发明内容

针对现有唑吡坦分离提取方法存在的上述缺陷，本发明提供了一种用于提取唑吡坦的唑吡坦分子印迹固相萃取小柱及其制备方法，其特异性、选择性强，灵敏度高。

因此，本发明的第一个目的是提供一种唑吡坦分子印迹聚合物，所述唑吡坦分子印迹聚合物以唑吡坦为模板分子，由功能单体与交联剂共聚得到。

本发明的第二个目的是提供一种所述唑吡坦分子印迹聚合物的制备方法，步骤包括：将唑吡坦与功能单体混合，使唑吡坦与功能单体充分作用，然后加入交联剂、引发剂，无氧条件下共聚，得到固体聚合物，去除唑吡坦。

其中，功能单体可以是（甲基）丙烯酸或其酯，如甲基丙烯酸，交联剂可以是丙烯酸酯或烷基取代丙烯酸酯，如二甲基丙烯酸乙二醇酯。

其中，功能单体与交联剂摩尔比优选为1:5~20。

其中，模板分子与功能单体摩尔比优选为1:1~10。

其中，所述引发剂可以是已知的任何用于引发所述功能单体和交联剂共聚的引发剂，本发明中优选为光引发剂，如苯偶酰类，或烷基苯酮类，优选为二苯基乙酮、α,α-二甲氧基-α-苯基苯乙酮、1,1-二甲基-1-羟基苯乙酮、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮等。

所述唑吡坦分子印迹聚合物的制备方法中，去除唑吡坦的步骤为用有机溶剂洗涤的方法，优选为在索氏抽气器中用甲醇-醋酸洗涤，甲醇与醋酸体积比为8:2。

本发明的第三个目的是提供一种使用上述唑吡坦分子印迹聚合物制备唑吡坦分子印迹固相萃取小柱，包括唑吡坦分子印迹聚合物、和空柱，唑吡坦分子印迹聚合物填装于空柱中。

本发明所述唑吡坦分子印迹固相萃取小柱中，唑吡坦分子印迹聚合物粒径优选为75~125μm。

本发明所述唑吡坦分子印迹固相萃取小柱中，唑吡坦分子印迹聚合物填装量优选为每1mL空柱中填装20~200mg、更有选为100mg唑吡坦分子印迹聚合物。

所述空柱优选为聚丙烯空柱。

根据本发明唑吡坦分子印迹固相萃取小柱的一种优选实施方式，在空柱中，唑吡坦分子印迹聚合物的上和/或下铺有玻璃纤维层。

本发明的第四个目的是提供一种使用上述唑吡坦分子印迹固相萃取小柱在唑吡坦分离提取和法医毒物分析中的应用。