[发明专利]用细胞系生产鸡传染性支气管炎病毒与疫苗

权利要求书

1.一种用细胞系生产鸡传染性支气管炎病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将细胞系经消化传代，以细胞生长液进行培养，形成生长良好的细胞单层；

2)将鸡传染性支气管炎病毒接种于上述细胞单层，进行鸡传染性支气管炎病毒的吸附；

3)将上述吸附病毒的细胞，换用细胞维持液培养，进行鸡传染性支气管炎病毒的增殖；

4)当CPE达到75％以上时，收获鸡传染性支气管炎病毒。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞系为Vero细胞系、BHK-21细胞系、PK-15细胞系、Marc145细胞系、ST细胞系、IBRS-2细胞系任意一种或几种细胞系。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中在接种病毒后，还包括加入孵育剂对细胞进行孵育20-40分钟的过程。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的孵育剂为D-氨基葡萄糖、干扰素或脂多糖。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的孵育时间为30分钟。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的鸡传染性支气管炎病毒是鸡传染性支气管炎病毒H₁₂₀株、H₅₂株、M₄₁株的一种或几种。

7.根据权利要求1～6所述的方法，其特征在于，步骤2)中接种用的鸡传染性支气管炎病毒是在鸡胚中传代获得的鸡传染性支气管炎病毒。

8.一种根据权利要求1～7任意一项所述的方法制备的鸡传染性支气管炎病毒，其特征在于，使用细胞系生产鸡传染性支气管炎病毒。

9.一种用细胞系生产鸡传染性支气管炎灭活疫苗的方法，其特征在于，使用权利要求8所述的鸡传染性支气管炎病毒，加入灭活剂，灭活后加入兽药学上可接受的疫苗佐剂制备为鸡传染性支气管炎灭活疫苗。

10.一种根据权利要求9所述的方法制备的鸡传染性支气管炎灭活疫苗，其特征在于，使用细胞系生产鸡传染性支气管炎灭活疫苗。

11.一种用细胞系生产鸡传染性支气管炎活疫苗的方法，其特征在于，使用权利要求8所述的鸡传染性支气管炎病毒，加入冻干保护剂，制备为鸡传染性支气管炎活疫苗。

12.一种根据权利要求11所述的方法制备的鸡传染性支气管炎活疫苗，其特征在于，使用细胞系生产鸡传染性支气管炎活疫苗。