[发明专利]抗蛋白酶解的抗体制剂

权利要求书

1.一种改变含Fc蛋白质对蛋白酶切割的稳定性的方法，所述方法包括修饰含Fc蛋白质中的唾液酸化糖形的量。

2.权利要求1的方法，其中所述含Fc蛋白质包含抗体制剂中的抗体。

3.权利要求2的方法，其中所述改变步骤包括对抗体制剂进行修饰，使得所述抗体基本上不含唾液酸化糖形，所述抗体的稳定性得到提高。

4.权利要求3的方法，其中所述对抗体制剂进行修饰的步骤选自将抗体宿主细胞与血清一起培养，在低pH下制备抗体，使用特异性宿主细胞和用糖基化修饰酶进行处理。

5.权利要求4的方法，所述方法进一步包括对抗体制剂进行修饰从而使所述抗体在糖形G0上基本上均一的步骤。

6.权利要求4的方法，其中所述修饰步骤包括用唾液酸酶A处理抗体制剂。

7.权利要求6的方法，所述方法进一步包括用唾液酸酶A处理后再用β-半乳糖苷酶处理抗体制剂的步骤。

8.权利要求3的方法，其中所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)、溶基质蛋白酶(MMP-3)、巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP-12)、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和糖基化修饰酶。

9.权利要求8的方法，其中所述蛋白酶在体外与抗体制剂接触。

10.权利要求8的方法，其中所述蛋白酶是木瓜蛋白酶。

11.权利要求8的方法，其中所述蛋白酶在体内与抗体制剂接触。

12.权利要求11的方法，其中所述蛋白酶与病理状况有关。

13.权利要求12的方法，其中所述病理状况是癌症。

14.酶在制备药盒中的用途，所述药盒用于通过使所述抗体与酶接触并监测酶的活性来评估抗体的糖基化情况。

15.权利要求14的用途，所述方法进一步包括将酶的活性与已知抗体组合物相关酶的已知活性进行比较。

16.权利要求14的用途，其中所监测的活性是抗体对切割的抗性。

17.权利要求16的用途，其中所述抗性通过Fab、F(ab’)2、Fv、facb或Fc片段的存在进行测定。

18.权利要求14的用途，其中所述酶是蛋白酶。

19.权利要求18的用途，其中所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、包括MMP-7在内的基质金属蛋白酶、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)、溶基质蛋白酶(MMP-3)、巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP-12)、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和糖基化修饰酶。

20.权利要求14的用途，其中所评价的糖基化情况包括糖基化的量。

21.权利要求14的用途，其中所评价的糖基化情况包括糖形含量。

22.一种将抗体快速切割成Fab、F(ab’)2、Fv、facb或Fc的方法，所述方法包括：

制备基本上去糖基化的抗体；

将该基本上去糖基化的抗体与蛋白酶接触。

23.权利要求22的方法，其中所述蛋白酶是木瓜蛋白酶。

24.一种将抗体快速切割成Fab、F(ab’)2、Fv、facb或Fc的方法，所述方法包括：

制备具有特定糖形组成的抗体；

使该抗体与蛋白酶接触。

25.权利要求24的方法，其中所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、包括MMP-7在内的基质金属蛋白酶、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)、溶基质蛋白酶(MMP-3)、巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP-12)、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和糖基化修饰酶。

26.一种将抗体快速消化成多个部分的方法，所述方法包括：

制备基本上去糖基化的抗体；

将该基本上去糖基化的抗体与蛋白酶接触。