[发明专利]增强鱼类疫苗免疫接种效果的佐剂及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及鱼类疫苗免疫防治技术，具体是一种可以增强鱼类疫苗免疫接种效果的佐剂及其应用。

背景技术

鱼类传染性疾病的病原主要包括细菌、病毒或寄生虫，能引起鱼类的急性、亚急性或慢性感染，导致水产养殖生产遭受病害的侵袭，造成严重损失，严重危害养殖业的可持续发展。采用抗生素或化学药物等方法进行预防或治疗，往往带来诸如微生物耐药性、产品药物残留及环境污染等弊端，对感染性疾病进行鱼类疫苗免疫接种可安全高效地腔制疾病发生与流行，是国际上普遍接受的疾病控制技术，对水产养殖产业的健康可持续发展具有重要意义。

针对细菌和病毒性病原的鱼类疫苗在国内外有广泛的研究，许多病原能够通过传统疫苗(包括灭活疫苗、细胞提取物、佐剂疫苗)实现良好的免疫保护，但某些特定病原，例如爱德华氏菌、气单胞菌、鲑鱼肾杆菌、病毒性出血性败血症病毒、神经坏死病毒、鲤春病毒血症病毒等的传统疫苗常达不到好的保护效果。近年来，分子免疫学及基因工程技术的迅猛发展促进新型鱼类疫苗(DNA疫苗、亚单位疫苗、减毒活疫苗)不断涌现并显示出良好的前景，但出于研制周期、成本及安全性等因素，因此许多鱼类疫苗离推广应用还有一定的距离。

疫苗佐剂是能提高疫苗特异性免疫保护率的物质，一些无机物、矿物油、表面活性剂、非特异性免疫增强剂都能成为免疫佐剂，但不是所有的非特异性免疫增强剂都具有提高鱼类疫苗的特异性免疫保护率的作用。目前在水产养殖业中有效疫苗免疫佐剂种类较少，其应用效果也不尽一致，为适应当前水产养殖疫苗制剂产业的快速发展及应用要求，新型高效鱼用佐剂开发具有重要意义。

中草药制剂作为新型免疫增强剂因其具有来源广泛，价格低廉，低残留，不宜导致病原菌产生耐药性等优点，近年来在水产养殖业中的应用也日益受到重视。黄芪(Astragalus membranaceus)是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，是种传统名贵中药材，对免疫系统、心血管及内分泌等多系统有着多种药理作用，其主要有效成分包括黄芪皂苷(Astragaloside IV)和黄芪多糖(Astragalus polysacharin)。其中黄芪皂苷又称黄芪甲苷被视为衡量黄芪质量优劣指标，具有改善心肺功能，加强机体免疫功能，抑制病毒繁殖和肿瘤生长的作用，研究证实黄芪提取物具有佐剂作用，可提高抗体效价，但高浓度的黄芪提取物对动物血液中红细胞具有一定的溶血作用。目前，黄芪提取物作为增强鱼类疫苗免疫接种的佐剂在国内外尚没有研究和应用报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种增强鱼类疫苗免疫接种效果的佐剂，以及这种增强鱼类疫苗免疫接种效果的佐剂的应用，以提高鱼类疫苗成分免疫接种后的特异性和非特异性免疫保护率，克服现有技术的不足。

本发明的免疫佐剂是豆科植物黄芪的根、茎、叶、花、籽、黄芪的提取物或含有有效成分的制品。本发明首先发现了黄芪的主要药用成分，包括黄芪皂苷(Astragaloside IV)和黄芪多糖(Astragalus polysacharin)，能起到增强鱼类疫苗免疫接种效果，它们就是本发明的免疫佐剂的有效成分。采用包含黄芪皂苷或黄芪多糖的单一组分或混合物都能用于鱼类疫苗佐剂，本发明证实了黄芪主要药用成分具有上述增强鱼类疫苗免疫接种效果的功效，因此本发明的有效成分的功效包含黄芪皂苷和黄芪多糖的天然产物、人工改造产物或人工合成产物。天然的黄芪皂苷和黄芪多糖可提取自蒙古黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)、膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)bungede)、豆科亚历山大黄芪(Astragalus alexandrines Boiss)、深裂黄芪(Astragalus dissectus)、绵毛黄芪(Astragalus sieversianus Pall)的干燥根或多刺黄芪(Astragalus spinosus Vahl)地上部分提取物等。黄芪多糖也可提取自黄芪的其他部位，如茎、叶、花、种子等，对于不改变黄芪皂苷和黄芪多糖这些有效成分的核心分子结构的人工改造产物或人工合成及仿制的产物可能增强或减弱本发明所涉及的功效，只要这种功效依然保留，就仍然受到本专利的保护。