[发明专利]一株灰黄青霉XJ-EP-058菌株及其抗香蕉枯萎病微生物制剂与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株香蕉内生真菌及其抗香蕉枯萎病微生物剂、应用和该微生物制剂的制备方法，属微生物农药技术领域。

背景技术

香蕉枯萎病(Banana vascular wilt)又称巴拿马病、黄叶病，是由半知菌亚门丝孢纲瘤座孢目镰刀菌属尖镰孢菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp.cubense(E.F.Smith) Snyder]引起的一种维管束病害，是香蕉的一种毁灭性病害。2007年5月我国将香蕉枯萎病列入进境植物检疫性有害生物名录。目前，香蕉枯萎病广泛分布于亚洲、非洲、澳大利亚、南太平洋及热带美洲的香蕉产区。我国于1960年首次在广西的芭蕉上发现香蕉枯萎病，20世纪70年代末在广东、福建、海南、云南等省区陆续发生，主要为害粉蕉、越南蕉等品种。

对香蕉枯萎病的防治，除在农业防治方面采用轮作换茬、地块选择、清洁田园、加强田间管理等措施来减少病害的侵染外，目前在很大程度上主要还是依赖于化学农药的使用，化学防治以其高效、简便的特点，仍然是生产上采用的主要措施之一。但是长期或过量使用单一农药，易导致病害产生抗药性，使得防效大大下降，且使农药残留量增加，天敌被大量杀伤，农田微生态平衡被破坏和环境被污染，因此,目前国内外在研制高效低毒化学农药的同时，对生物农药的研制也给予了极大重视，目前在农业病虫害防治中生物防治被认为是最具有发展潜力的防治方法，其中微生物制剂是一种重要类型。

发明内容

本发明的目的是提供一株对香蕉枯萎病具有很好防治效果的灰黄青霉菌株及其抗香蕉枯萎病微生物制剂和应用，以及该该微生物制剂的制备方法。

本发明目的是通过以下技术方案来实现的：

1、本发明提供的一株灰黄青霉菌株是灰黄青霉（Penicillium griseofulvum ）XJ-EP-058 CGMCC No. 5467。

所述的灰黄青霉（Penicillium griseofulvum ）XJ-EP-058 CGMCC No. 5467于2011年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称：CGMCC），保藏号是CGMCC No. 5467，该普通微生物中心地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

所述的灰黄青霉（Penicillium griseofulvum ）XJ-EP-058 CGMCC No. 5467是从云南省西双版纳州勐腊县勐捧镇一株巴西蕉根部分离得到，其形态特征为：菌落白色，中央为青色，短绒毛状，基质为白色，中央为黄褐色；分生孢子梗不对称分枝，分生孢子串生，球形，顶端排成帚状。

2、一种抗香蕉枯萎病微生物制剂的制备方法，其步骤如下：

（1）试管种培养

将灰黄青霉（Penicillium griseofulvum ）XJ-EP-058 CGMCC No. 5467菌株接种到试管固体培养基斜面上，于28°C下培养7天，获得试管种；所述的固体培养基的配方为：马铃薯 200g；葡萄20g；琼脂15~20 g；蒸馏水1000ml；pH 7.0；

（2）液体种子培养

采用三角瓶摇瓶培养，方法是：

①配制液体种子培养基，按液体种子培养基配方所述的各成分及其含量混合而成液体种子培养基，所述的液体种子培养基的配方是：葡萄糖20.0g，蛋白胨10.0g，酵母浸膏5.0g，蒸馏水1000ml，pH 7.0；

②在每个三角瓶中装入100ml所述的液体种子培养基，121°C灭菌30min，冷却后接入1cm²的试管种，28°C下于转速为220 rpm的摇床上培养2天；

（3）制备所述的抗香蕉枯萎病微生物制剂

采用三角瓶摇瓶培养，方法是：

①    配制液体发酵培养基，按液体发酵培养基配配方所述的各成分及其含量混合而成液体发酵培养基，液体发酵培养基配方是：马铃薯200g；葡萄糖20 g；自来水1000ml，pH 7.0；

②    在每个三角瓶中装入200ml液体发酵培养基，121°C灭菌30min，冷却后接入10ml步骤（2）培养得到的液体种子，28°C下于转速为220 rpm的摇床上培养7天得发酵液；