[发明专利]一种临床病例监测管理系统

权利要求书

1.一种II型糖尿病临床病例监测管理系统，其特征在于，所述监测管理系统包括取血装置和糖化血红蛋白检测装置；所述取血装置为静脉留置针或采血笔；所述糖化血红蛋白检测装置为糖化血红蛋白检测试剂盒，所述试剂盒包括糖化血红蛋白磁分离试剂，酶标抗体，增强剂，校准品、控制品，浓缩液以及底物；

所述试剂盒按照如下步骤制备：

第一步：磁分离试剂的制备步骤：

1)将1.0mg辛二酸二琥珀酰亚胺酯溶于50ul DMSO中，取2mg抗糖化血红蛋白单克隆抗体溶于PH 9.5的0.1mol/L PB缓冲液中至总体积为1ml；

2)用移液枪吸取步骤1中的辛二酸二琥珀酰亚胺酯加入到步骤1的抗体溶液中，置室温90min；

3)将步骤2获得的溶液加入到浓缩管中然后放入到高速冷冻离心机中在3000g下浓缩30min至体积为0.5ml；

4)取0.5ml磁珠，加入5ml反应杯中，放入试管架，经磁铁吸附2分钟后吸取上清；

5)加入步骤3获得的溶液到上述磁珠中，混匀后室温反应4小时；

6)加入0.3ml 1mol/L的TRIS溶液37℃15分钟；

7)加入1.5ml PH 7.20.1mol/L PB清洗已经标记的磁珠，混匀30秒，上架，去上清；

8)用100ml磁珠保存液将磁珠转入125ml玻璃瓶；磁珠保存液配方为0.1％BSA，0.05％吐温-20，0.02％NaN3，20％乙醇；

9)将步骤8获得的溶液用磁珠缓冲液按照1∶1的体积比例混匀，即得磁分离试剂；所述磁珠缓冲液为浓度是1mol/L的TRIS-HCl缓冲液；

第二步：酶标抗体制备步骤：

1)2.5mg糖化血红蛋白单克隆抗体溶于1.0ml的N，N-二甲基甲酰胺中，加入1ml的10mg/ml辣根过氧化物酶水溶液和1.3mg碳化二亚胺，1小时后将1.0ml 20mg/ml的碳化二亚胺加入，混合物不断搅拌，4℃过夜；

2)将步骤1的溶液装入透析袋中，对0.15M的PH7.4PBS透析，4℃过夜，收集保留液；然后加入10ml浓度为15mg/ml的BSA溶液，4℃储存备用；最后将上述溶液用酶标抗体稀释液以1∶1000的体积比混合均匀，即得酶标抗体；所述酶标抗体稀释液为浓度是1mol/L的TRIS-HCl缓冲液；

第三步：增强剂配制步骤：

1)称取TRIS1.56g和NaCl 4.23g于1L容器中；用移液器将Proclin-300量取0.2ml于10ml纯化水的烧杯中完全溶解后，倒入上述1L容器中；

2)用量筒量取800ml纯化水于上述1L容器中，充分搅拌，直至完全溶解，调PH在7.35-7.45之间；

3)称取Mak330.9g于上述1L容器中；最后定容1000ml，完全溶解后，用0.2um滤器过滤；

第四步：

校准品和控制品的配制：

将糖化血红蛋白抗原配成浓度分别为50、100、200、400、800ng/ml的校准品；将糖化血红蛋白抗原配成浓度分别为100、400ng/ml的控制品；

第五步：

浓缩液配制步骤，配制1L：

1)称取TRIS 12.54g和NaCl 325.6g于1L容器中；

2)称取5g Tween-20于100ml容器中加20ml水使其完全溶解后，倒入上述1L容器中；

3)用移液器将Proclin-300量取0.2ml于盛有10ml纯化水的烧杯中完全溶解后，倒入上述1L容器中；

4)用量筒量取800ml纯化水于上述1L容器中，充分搅拌，直至完全溶解；

5)调PH，控制其范围在7.35-7.45之间；

6)最后定容1000ml，完全溶解后用0.2um滤器过滤即得；

第六步：

底物配制步骤，配制1L：

1)称取TRIS 2.35g、NaCl 6.41g、Na₂SO₃ 0.002g和Proclin-3000.2ml于1L烧杯中；

2)用量筒量取600ml纯化水于1L烧杯中，充分搅拌，直至完全溶解，调PH，控制其范围在7.95-8.05之间；

3)加入250ml Lumi-Phos 530后，用0.2um滤器过滤收集滤液，用纯化水定容至1000ml，混匀后即得。

2.如权利要求1所述的监测管理系统在指导病人用药中的用途。

3.如权利要求1所述监测管理系统的使用方法，其特征在于，

1)采用取血装置对病人取血获得检测样本；

2)加15μl糖化血红蛋白校准品、控制品、检测样本至对应试管底部；

3)加30μl酶标抗体、30μl增强剂以及30μl磁分离试剂至每一试管中；

4)用塑料薄膜覆盖试管，多管混匀器轻轻振荡试管架30s后，置37℃水浴30分钟；

5)试管连架放至磁分离器上，沉淀2分钟，然后缓慢的倒转分离器倒出上清液；

6)浓缩液用纯化水稀释20倍后，加200μl稀释后的浓缩液至每一试管中，置多管混匀器上轻轻振荡混匀30s；

7)加200μl底物至试管中混匀3秒，迅速用准备好的发光检测仪进行检测。