[发明专利]高产L-色氨酸的大肠杆菌工程菌有效
| 申请号： | 201110400855.X | 申请日： | 2011-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN102453691A | 公开（公告）日： | 2012-05-16 |
| 发明（设计）人： | 于传军;左良成;徐宝兴;徐洪利;赵体金;李水仙;王东杰;戴晓燕;丁贞科 | 申请（专利权）人： | 山东鲁抗生物制造有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;王加岭 |
| 地址： | 273517*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高产 色氨酸 大肠杆菌 工程 | ||
1.一种高产L-色氨酸的大肠杆菌(Escherichia coli)工程菌，其特征在于，其是以大肠杆菌W3110为出发菌，采用tac启动子突变体串联基因组上表达trpEfbrDCBA基因，同时失活或敲除大肠杆菌W3110中的tnaA、trpR和tyrR基因，并突变tyrA和pheA基因，使其表达的酶活力弱化，并向改造后的菌株中转入含有串联表达来源于大肠杆菌K12的AroFfbr或AorGfbr、tktA和ppsA基因以及来源于枯草芽孢杆菌的SerA基因的低中拷贝质粒而构建得到的；
其中，所述tac启动子突变体的碱基序列如Seq ID No.2-4所示，其在基因组上的整合位点为trpL-trpE基因处，以Δtac-trpEfbr替换trpL-trpE基因。
2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述tac启动子突变体的碱基序列如Seq ID No.3所示。
3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述串联表达来源于大肠杆菌K12的AroFfbr或AorGfbr、tktA和ppsA基因以及来源于枯草芽孢杆菌的SerA基因的低中拷贝质粒为pACYC184。
4.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，突变tyrA基因编码的氨基酸残基位点突变为H131A或H153N或H189N或H197N或H239N或H245N或H257A或H265A或H347N。
5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于，突变tyrA基因编码的氨基酸残基位点突变为H131A。
6.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述突变pheA基因编码的氨基酸残基位点突变为K39N或K39Q或K39R或Q88E或Q88R或L7C或L7M或D48Q或D48C或D48L或I81L或I81F或V35L。
7.根据权利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述突变pheA基因编码的氨基酸残基位点突变为D48Q。
8.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述trpEfbr基因为抗反馈抑制的邻氨基苯甲酸合成酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.32所示。
9.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述AroFfbr基因为来源于大肠杆菌K12的磷酸-2-脱氢-3-脱氧庚糖酸醛缩酶DAHP基因的抗反馈抑制突变基因，其编码的148位氨基酸残基位点脯氨酸(P)突变为亮氨酸(L)。
10.一种高产L-色氨酸的大肠杆菌(Escherichia coli)工程菌XT0015，保藏号为CCTCC M 2011316。
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