[发明专利]红芪多糖3的分离物及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及红芪多糖3的分离物及其用途，属于天然药物化学技术领域。 

背景技术

红芪(Radix Hedysari)系豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz)的根.为甘肃特产名贵药材，中医将其作为传统中药，在临床上其具有强心，降糖，利尿，抗病毒，抗衰老等功效。红芪多糖作为其主要活性成分之一，其中HPS-3部分具有较明显的降血糖及体外抗氧化等作用。 

目前国内外对红芪的化学成分已有了较详细的报道，而对于红芪多糖研究，还只是停留在一级结构及一些药理作用的研究。1997年兰州大学的刘方明从红芪中提取分离出一种均多糖-葡聚糖，并对其结构进行研究；李世刚等通过葡聚糖凝胶柱层析分离纯化得到3个HPS组分，仅用气相色谱法分析了3个HPS组分的单糖组成，并对HPS体外抗肿瘤活性及构效关系进行研究；2009年马守军等对甘谷红芪酸性多糖的纯化及结构进行了初探。马丹等通过分步醇沉法和凝胶柱色谱获得HPS-3纯品，气相色谱法测定其组成。多糖作为生物高分子化合物，药理活性，与其理化性质密切相关，因此，了解其理化性质显得尤为重要。 

近年来国内学者相继报道了六味地黄多糖、仙人掌茎粗多糖、北五味子多糖、肉苁蓉多糖、南沙参多糖、滑菇多糖、黄芪多糖和莲子多糖等中药多糖具有抗衰老作用。但关于红芪多糖抗衰老、抗辐射效果的研究，国内、外尚未见报道。而对于多糖降血糖、提高免疫力报道也甚少，本实验首次探讨了红芪多糖抗衰老、降血糖和及降血脂的可能作用机制，为中药延缓衰老和降糖研究开辟新的领域，并对红芪多糖抗辐射和提高免疫力进行了研究。 

发明内容

本发明在于提供了红芪多糖3的四个分离组分，并对其药物价值做了分析。 

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案： 

红芪多糖3的分离物，经如下步骤制得： 

红芪多糖3经脱蛋白、脱色素后，过Sephadex凝胶柱，先用蒸馏水洗脱，再用含0～2M不同浓度NaCl的NaAc-HAc缓冲盐洗脱，得到红芪多糖3-A、红芪多糖3-B、红芪多糖3-C、红芪多糖3-D 4个组分。 

具体地，经如下步骤制得： 

(1)红芪多糖3经Sevag法脱蛋白，双氧水脱色，将脱色后的红芪多糖3溶液浓缩至一定体积，用终浓度为50％～90％乙醇沉淀1～3次，冷冻干燥；脱色后的红芪多糖3用水溶解后，过DEAE-cellulose 52柱色谱，分别用含0～2M不同浓度NaCl的NaAc-HAc缓冲盐洗脱，洗脱溶液的PH值保持4～7，苯酚-硫酸法示踪，得到4个组分； 

(2)以上4个组分分别反复过Sephadex G-100、Sephadex G-75凝胶柱，用蒸馏水洗脱，得到红芪多糖3-A、红芪多糖3-B、红芪多糖3-C、红芪多糖3-D 4个组分。 

步骤(1)中所述红芪多糖3-A为球形构象，重均分子量Mw为3～20KDa，均方根旋 转半径Rg为20～70nm，多分散系数Mw/Mn为1.000～1.300，红芪多糖3-A各单糖组成的摩尔比例为：葡萄糖(Glc)∶半乳糖(Gal)＝70～95∶1～10，多糖含量为80～100％；红芪多糖3-A是由α-D-(1→4)吡喃(缩写为p)葡萄糖构成主链，每隔3～7个糖残基在O-6位有1个分支，其中分支上含有→1)Glc，→1)Gal(4→，每8～12个糖残基有1个硫酸基，硫酸基位于Gal的O-6位。 

结构如式Ⅰ所示： 

其中，n＝1～14。 

所述红芪多糖3-B为高支化度结构，Mw为10～200KDa，Rg为11～25nm，Mw/Mn为1.005～1.410，单糖组成的摩尔比例为：阿拉伯糖∶半乳糖∶葡萄糖∶鼠李糖(Rha)＝10～55∶5～50；1～15∶1～20，多糖含量为70～99％；红芪多糖3-B以β-D-(1→4)半乳糖及β-D-(1→4)半乳糖醛酸构成主链，其中还有大量支链，每1～7个糖残基在O-6位有1个较短或长支链，支链上有→1)Ara(5→与→1)Rha(2→，另外还有非还原末端α-D-(1→)吡喃葡萄糖，Ara(1→，每13～19个糖残基有1个硫酸基，硫酸基存在于β-D-(1→4)半乳糖的O-6位；红芪多糖3-B主要含缬氨酸(Val)(37.5％)和甘氨酸(Gly)(22.3％)。 

结构如式II所示： 

其中，n＝1～85。