[发明专利]一种伤寒沙门氏菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种不含抗性标记的伤寒沙门氏菌基因缺失菌株，由其构建的疫苗及该疫苗的应用，属于动物细菌基因工程技术领域。

背景技术

沙门氏菌(Salmonella)是寄生于人和动物体内的一种革兰氏阴性杆菌。在人、家畜、家禽、野生动物、啮齿动物体内常分离到沙门氏菌，本属细菌也常存在于水、乳、肉、蛋中及其他食品和饲料中。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。某些沙门氏菌是重要的人畜共患病原，有些是动物疾病病原，有些是人和动物食物中毒或饲料中毒常见病原性细菌，因而本属细菌在食品卫生、外贸出口、人畜疾病发生中均十分重要。据统计在世界各国的各种细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。细胞免疫反应性与大剂量沙门氏菌攻击动物的保护性通常呈现很好的相关性。但体液抗体可加速病原菌的排出。动物接触环境中的沙门氏菌或在注射疫苗后，其体液免疫应答主要是IgM抗体。在疾病康复或口服弱毒苗感染的动物肠道中，可出现特异性分泌型IgA。动物在感染沙门氏菌病愈后，可获得坚强的免疫力，能抵抗再次感染。目前应用的兽用疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病，例如猪霍乱沙门氏菌(S.choleraesuis)、马流产沙门氏菌(S.abortusequi)以及牛、羊都柏林沙门氏菌(S.dublin)等灭活疫苗，在国内外均已应用，两次接种即可预防孕畜流产或幼畜感染。据报道，用减毒或无毒活菌注射或口服免疫动物，效果优于灭活菌苗。

人类感染的沙门氏菌主要来源于畜禽，而沙门氏菌感染家畜后可引起一系列的临床疾病并成为肉制品污染的一个重要来源。因此，国内外动物检疫规程均把沙门氏菌列为重要的卫生检出指标之一。伤寒沙门氏菌(S.typhi)是一种常见、重要的人畜共患肠道病原菌，不仅能导致鸡白痢、家畜流产等动物性疾病发生，还能使人类发生伤寒、败血症、胃肠炎和食物中毒等疾病。1877年几乎同时由德国细菌学家Karl Joseph Eberth和Robert Koch从伤寒病人粪便中发现伤寒沙门氏菌，1884年德国细菌学家Georg T.A.Gaffky从病人脾脏中再次分离到该病原菌，并鉴定出其抗原结构式为：9，12，[Vi]:d:-，为革兰氏阴性杆菌，兼性厌氧，具周身鞭毛，能运动，不形成芽孢。伤寒沙门氏菌能引起人和动物全身性、急性、发热性的感染，致病菌主要侵入网状内皮系统、肠道淋巴结及胆囊，并导致广泛的全身性临床症状，主要表现为持续性高热、腹痛及小肠结肠炎等症状。在成人和年长儿童常出现便秘，而幼龄儿童则常出现腹泻。虽然随着社会卫生条件的改善，可降低伤寒的发病率，但由于耐药菌株的不断增多，应用免疫预防手段仍然是控制本病的有效措施，因此伤寒疫苗的研究对预防伤寒病的发生具有更实际的意义。