[发明专利]具有神经保护作用的肽及其制备方法、药物组合物和用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体而言，本发明涉及一种具有神经保护作用的肽、其制备方法、含有这种肽的药物组合物及所述肽的制药用途。

背景技术

MLK3(混合性谱系激酶，Mixed lineage kinase 3)是MAPKKK(促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶)家族的MLKs亚家族成员，它通过磷酸化作用激活MAPK(促分裂原活化蛋白激酶)通路的丝/苏氨酸蛋白激酶，是JNK3(c-Jun N末端激酶家族成员)上游重要激酶(Gallo KA等人，Nature reviews，2002年9月，3(9)：663-72；Ip YT等人，Curr Opin Cell Biol，1998，10：205-219)。MLK3由SH3(Src homology 3)结构域、激酶结构域、亮氨酸拉链结构域、Cd4c2/Rac相互作用的结构域组成，可以通过277位苏氨酸和281位丝氨酸发生自身磷酸化，又可通过其自身SH3结构域的连接发挥自身抑制功能，MLK3的自身磷酸化和它的激活有着密切的关系(Hua Z等人，J Biol Chem，2001，276：45598-45603)。

研究发现，阻断MLK3-MKK7-JNKs信号通路对脑缺血、β-淀粉样肽(Aβ)诱导的神经元损伤有显著的保护作用(Pan J等人，Neuroscience2005；131(1)：147-59)。以上结果提示，MLK3信号通路参与中枢神经系统疾病，它和许多促凋亡和抗凋亡因子相互作用并最终决定细胞的生与死，这种平衡的失常将会导致各种疾病的发生。因此，MLK3是中枢神经系统疾病新的治疗靶点。目前受体酪氨酸激酶TrkA(酪氨酸激酶)抑制剂K252a虽然可抑制MLK3，以抑制细胞的凋亡，促进细胞的生长发育(Kaneko M等人，J Med Chem，1997，40：1863-1869)，但K252a并不是特异性的MLK3抑制剂。CEP1347和CEP11004虽然是MLK3抑制剂，但它抑制病理状态下过度活化的MLK3的同时也抑制了MLK3的生理功能，在Ⅱ期临床实验中失败(Parkinson Study Group PRECEPT Investigators.Neurology 2007；69：1480-1490)。

研究表明，PSD-95(突触后致密物质95，postsynaptic density-95)与MLK3的特异结合可促进MLK3的活化。PSD-95是组成兴奋性突触的突触后致密物质的一个关键蛋白，它属于膜相关的鸟苷酸激酶(membrane-associated guanylate kinases，MAGUK)蛋白家族中的一员，又被称为脚手架蛋白，在兴奋性突触的PSD中募集信号蛋白(Kennedy MB，Trends Neurosci，1997，20：264-268；Sheng M.Proc.Natl.Acad.Sci.USA，2001，98：7058-7061；Sheng M等人，Science，2002，298：776-780；Sheng M.J Cell Sci，2001，114(Pt 7)：1251)。PSD-95由N-端3个PDZ(PSD-95/Dlg/ZO-1)结构域，1个SH3结构域和C-端无活性的鸟苷酸激酶(GK)结构域组成(Anderson JM.1996 Curr Biol，6：382-384；Gonzalez-Mariscal L等人，Semin Cell Dev Biol，2000，11：315-324)。PSD-95通过其SH3结构域与MLK3的C末端富含脯氨酸(proline-rich region domain，PRD)的结构域结合形成PSD-95-MLK3复合体(Whitmarsh AJ等人，Davis RJ.Science，1998，281：1671-1674；Savinainen A等人，JBiol Chem，2001，276：11382-11386)。本发明人的研究表明MLK3在生理状态下活性较低，与PSD-95不结合，但病理状态下MLK3与PSD-95结合增加，并且被激活，从而导致下游信号通路激活而引起细胞凋亡，因此阻断MLK3与PSD-95在病理状态下的结合从而阻断下游信号通路的激活对细胞损伤具有保护作用。

发明内容

本发明人研究发现靶向于PSD-95-MLK3复合体的肽对病理状态下过度激活的MLK3有抑制作用，从而可用作神经保护药物。因此，开发这种MLK3特异性肽抑制剂对研究和开发神经元保护药物，预防和/或治疗脑卒中、神经退行性疾病、癫痫以及疾病的免疫炎性反应等的治疗药物具有重要意义。