[发明专利]干法制取DHA微藻油的方法

权利要求书

1.一种干法制取DHA微藻油的方法，包括以下步骤：

a)将微藻发酵液进行破壁处理，得到破壁后的发酵液；

b)破壁后的发酵液用絮凝剂处理，使破壁后的菌丝体和油脂发生絮凝和聚集，经固液分离，得到分离后的固态物；

c)分离后的固态物，经过造粒、干燥、粉碎后，再用有机溶剂萃取或者物理压榨提取，得到DHA微藻油。

2.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述步骤b)中，用絮凝剂处理的条件：反应温度为10～60℃，搅拌转速为60～300rpm；PH为3.0～7.0。

3.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述步骤b)中，用絮凝剂处理的条件：反应温度为20～50℃，搅拌转速为150～300rpm；PH为3.0～5.0。

4.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述步骤b)中，用絮凝剂处理的最适条件：反应温度为30℃，搅拌转速为180rpm；PH为4.0。

5.根据权利要求1或2所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述絮凝剂选用离子度60～100的絮凝剂，所述絮凝剂使用量为发酵液质量的0.05～0.6％，所述絮凝剂溶液的质量百分比浓度为0.1～10％。

6.根据权利要求1或2所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述絮凝剂为壳聚糖、聚合氯化铝、聚丙烯酰胺、明矾、硫酸铝、无水氯化钙、聚合硫酸铁的一种或几种的混合。

7.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：所述步骤c)中，所述有机溶剂为正己烷，溶剂的使用量与分离所得的固态物的体积相等。

8.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：

步骤a)将微藻发酵液进行生物酶破壁处理，得到破壁后的发酵液；

步骤b)在破壁后的发酵液中加入壳聚糖，壳聚糖的使用量为发酵液质量的0.2～0.5％，所述壳聚糖溶液的质量百分比浓度为3～6％，在反应温度20～40℃，搅拌转速为120～280rpm；PH为4.0～6.0的条件下进行絮凝反应，使破壁后的菌丝体和油脂发生絮凝和聚集，从而实现固液分离，得到分离后的固态物；

步骤c)分离后的固态物，经过造粒、干燥、粉碎后，用正己烷萃取或者物理压榨提取，得到DHA微藻油。

9.根据权利要求6所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：选用多种絮凝剂复配使用的情况下，采用分步加入的方法，先加入离子度较高的絮凝剂，待发酵液絮凝现象出现时，再加入较低离子度的絮凝剂，进一步加强絮凝效果，以便于固液分离。

10.根据权利要求1所述的干法制取DHA微藻油的方法，其特征在于：

a)取1000ml吾肯氏壶藻发酵液，搅拌均匀，加热至55℃，调节PH至8.5，然后加入发酵液体积0.25％的破壁复合酶，酶解6小时，得到破壁后的吾肯氏壶藻发酵液；

b)先称取壳聚糖，配成质量百分比浓度为5％的高离子度絮凝剂溶液，按照0.3％的添加量加入到酶解后的吾肯氏壶藻发酵液中，于30℃、PH＝4.0下以180rpm的转速搅拌10min，直至发酵液中菌体出现明显絮凝聚集状态；再将预先配好的质量百分比浓度为5％的低离子度聚丙烯酰胺絮凝剂溶液，按照0.1％的添加量加入到上述发酵液中，于30℃、PH＝4.0下以180rpm的转速搅拌5min，进一步加强絮凝效果，再用离心机分离，去除水层，分离得到150ml固态菌体；

c)将获得的固态物经过造粒机造粒后，在60℃条件下烘干至水分含量5％以下，研碎成颗粒，然后用正己烷150ml萃取颗粒中的DHA油脂。