[发明专利]一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法有效
申请号: | 201110404788.9 | 申请日: | 2011-12-08 |
公开(公告)号: | CN102492653A | 公开(公告)日: | 2012-06-13 |
发明(设计)人: | 张传森;李晓童;张喜 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/071 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 赵青 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 成体 成熟 脂肪 细胞 诱导 化为 心肌 方法 | ||
1.一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法,具体步骤如下:
A、分离出成体兔的白色脂肪组织;
B、酶消化法获得上层白色脂肪层部分;
C、采用天花板法培养后再常规培养;
用20%完全培养基或者5%的完全培养基,中和胶原酶I并过滤,收集过滤液1000-1500rpm离心3-5min;
D、取上层白色细胞层采用20%的完全培养基倒置培养至少七天后常规培养;
所述的完全培养基配方为FBS、高糖培养基和1%抗青霉素-链霉素。
2.根据权利要求1所述的一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法,其特征在于分离出成体兔的白色脂肪组织后用0.1M的PBS冲洗,剪成糜状。
3.根据权利要求1或2所述的一种从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化为心肌样细胞的方法,其特征在于步骤B中,用胶原酶I,37℃的环境下消化40-50min。
4.一种如权利要求1、2或3的方法制备得到的从成体兔的成熟脂肪细胞诱导分化得到的心肌样细胞。
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