[发明专利]一种天然红色素卟啉锌的制备方法

权利要求书

1.一种天然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于包含如下步骤：

(1)Zn²⁺螯合酶的制备：称取洗净的动物肝脏及心脏放入组织捣碎机中加等质量的蒸馏水绞碎，15000g条件下离心8～15min，重复2～3次后得到沉淀的细胞组织即为Zn²⁺螯合酶；

(2)卟啉锌的制备：分别称取步骤(1)中制备的Zn²⁺螯合酶，含锌离子化合物和底物，加入蒸馏水溶解混合后于55～65℃反应5～7h得到卟啉锌溶液；其中所述的含锌离子化合物为氯化锌、醋酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌或柠檬酸锌中的一种；底物为原卟啉二钠、氯化血红素、血红蛋白或肌红蛋白中的一种；

(3)卟啉锌的分离纯化：利用高效液相色谱仪对步骤(2)中制备的卟啉锌进行分离纯化。

2.根据权利要求1所述的天然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于所述的Zn²⁺螯合酶在蒸馏水中的终浓度为0.1～0.3g/mL，底物在蒸馏水中的终浓度为0.5～5g/L，含锌离子化合物在蒸馏水中的终浓度为0.05～1.5g/L。

3.根据权利要求2所述的天然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于所述的(2)卟啉锌的制备具体包括如下步骤：

(a)分别称取步骤(1)中制备的Zn²⁺螯合酶、底物和含锌离子化合物，加入蒸馏水溶解混匀，其中Zn²⁺螯合酶的终浓度为0.1～0.3g/mL；所述的底物为原卟啉二钠、氯化血红素、血红蛋白、肌红蛋白中的一种，底物终浓度为0.5～5g/L；含锌离子化合物为氯化锌、醋酸锌、硫酸锌、葡萄糖酸锌或柠檬酸锌中的一种，含锌离子化合物终浓度为0.05～1.5g/L；

(b)上述混合溶液置于水浴锅中，55～65℃反应5～7h；

(c)添加1～2倍上述混合液体积的75％丙酮提取卟啉锌。

4.根据权利要求1所述的然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于所述的(3)卟啉锌的分离纯化将制备的卟啉锌采用高效液相色谱仪进行分离纯化，具体包含如下步骤：

(a)设置柱温为25℃，流速为0.5-0.8mL/min，紫外/可见检测波长420nm；

(b)采用pH9.0体积比为76∶24的甲醇/0.01M磷酸氢二钠为洗脱液。

(c)记录仪上的基线平直后，进样20μL；

(d)收集出峰时间为7.8～8.5min的组分，经过3～4次分离纯化得到纯化的卟啉锌溶液。

5.根据权利要求1所述的天然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于所述的动物肝脏及心脏为猪或牛的肝脏及心脏。

6.根据权利要求1所述的天然红色素卟啉锌的制备方法，其特征在于该方法还包括将步骤(3)分离纯化的卟啉锌溶液混合后经冷冻干燥得到卟啉锌粉末。