[发明专利]一种葡萄糖异构酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种葡萄糖异构酶突变体，其特征在于在NCBI登陆号YP_289661所示的氨基酸序列中进行一个或多个酶的氨基酸位点的取代。

2.权利要求1所述的葡萄糖异构酶突变体，其特征所述氨基酸取代位点为第243位苯丙氨酸、第244位组氨酸、284位脯氨酸、286位组氨酸的一个或其组合。

3.权利要求2所述的葡萄糖异构酶突变体，其特征是第244位组氨酸、第243位苯丙氨酸分别突变为脯氨酸、丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸中的一种。

4.权利要求2所述的葡萄糖异构酶突变体，其特征是第243位苯丙氨酸、第244位组氨酸、284位脯氨酸、286位组氨酸均突变为脯氨酸、丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸中的一种。

5.权利要求2所述的葡萄糖异构酶突变体，其特征是第286位组氨酸突变为脯氨酸、丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸中的一种。

6.权利要求1-5任一所述突变体应用于葡萄糖到果糖的转化或制备果葡糖浆。

7.权利要求6所述应用，其特征在于葡萄糖到果糖的转化的处理工艺控制温度为70℃，pH为7.5。

8.编码权利要求1-5任一所述葡萄糖异构酶突变体的核苷酸序列。

9.一种生产权利要求1-5任一所述葡萄糖异构酶突变体的方法，其特征是由嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)总DNA获得葡萄糖异构酶基因，NCBI编码为CP000088，经定点突变后，突变基因以质粒pT7-7或能表达该酶的质粒为表达载体，以E.coli BL21(DE3)或能表达该酶的菌株为表达宿主，实现葡萄糖异构酶基因的高效表达。