[发明专利]角鲨烯合成酶抑制剂CJ-13982的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及利用植物内生真菌稻黑孢(Nigrospora oryzae)A8发酵制备具有抑制角鲨烯合成酶作用的化合物CJ-13982的方法。

背景技术：

随着我国人口的老龄化，心血管病发病率和病死率逐年上升，冠心病是其中的主要杀手。我们常说的冠心病多由动脉器质性狭窄或阻塞引起，又称冠状动脉粥样硬化性心脏病，其冠状动脉狭窄多系脂肪物质沿血管内壁堆积所致，这一过程称之为动脉硬化。动脉硬化发展到一定程度，冠状动脉狭窄逐渐加重，限制流入心肌的血流。心脏得不到足够的氧气供给，就会发生胸部不适，即心绞痛。冠心病是指冠状动脉粥样硬化导致心肌缺血、缺氧而引发的心脏病，常伴发心绞痛。目前该病严重威胁中老年人的健康，是造成中老年人死亡的主要原因，如何降低其发病率及减少死亡率已成为世界各国关注的研究课题。

引起动脉硬化的脂肪物质的主要成分是胆固醇，许多研究表明，胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平与冠心病的发病率密切相关。由于人体内大约有70％胆固醇源于体内合成，所以抑制其体内合成是一种有效降低胆固醇的方法。羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂(如洛伐他汀)是目前最有效的降胆固醇药。据报道，冠心病病人使用HMG-CoA还原酶抑制剂降低血浆高胆固醇后，死亡率可降低约1/3。但是，当体内甲羟戊酸合成途径中的关键酶——HMG-CoA还原酶被抑制后，不仅胆固醇的合成减少，由甲羟戊酸进一步合成的非甾醇类异戊二烯(如多萜醇)等物质也相应减少，而这些物质是细胞正常生长、分化和发育所需要的。因此HMG-CoA还原酶抑制剂会对细胞的生长、增殖和分化产生影响，并由此引起多种不良反应。另外，有证据表明：血中甘油三酯过多是引起冠状动脉心脏病的又一原因，而HMG-CoA还原酶抑制剂几乎没有降低血浆甘油三酯的作用。所以，需要有比HMG-CoA还原酶抑制剂更安全有效的降血脂药。

角鲨烯合成酶(squalene synthase，SQS)是体内胆固醇合成、代谢途径中的一种重要酶，它能催化两分子法呢基二磷酸(FPP)经还原性二聚作用，产生中间体前角鲨烯二磷酸，在NADPH的还原作用下，前角鲨烯二磷酸生成角鲨烯，后者再经进一步合成生成胆固醇。抑制SQS的活性，就能减少角鲨烯的生成量，从而降低胆固醇的水平，而且因为SQS的催化反应在合成类异戊二烯的分支途径之后，所以SQS抑制剂对类异戊二烯的合成没有影响。而且，还有报道指出，SQS抑制剂不仅能降低血浆胆固醇水平，还降低血浆甘油三酯水平。所以，SQS成为了治疗高脂血症和冠状动脉心脏病的极具吸引力的作用靶点，其抑制剂的研究也已成为降血脂药物研制的一个重要方向。

在文献“CJ-13981 and CJ-13982，new squalene synthase inhibitors，J.Antibiot.，2001，54(12)，1025-1030”中，作者从一株未鉴定的真菌CL15036中分离得到了本发明专利中的活性化合物CJ-13982及一个结构类似物CJ-13981，通过质谱和核磁共振技术鉴定了其平面结构，并测试了两个化合物对大鼠和人体肝脏微粒体中SQS的抑制活性，结果表明，CJ-13982对大鼠和人体肝脏微粒体中SQS的IC₅₀分别为2.2和1.1μM。在文献“Total synthesis and determination of the absolute stereochemistry of the squalene synthase inhibitors CJ-13981and CJ-13982，Tetrahedron Lett.，2009，50(26)，3388-3390”中，作者通过全合成的方法确定了本发明专利中的活性化合物CJ-13982及其结构类似物CJ-13981的绝对构型。

化合物CJ-13982的结构如式(I)所示：

式(I)

但到目前为止，在国内外文献报道中，均未有从别的途径得到化合物CJ-13982的报道。

发明内容：

本发明的目的是提供一种从稻黑孢(Nigrospora oryzae)A8的发酵培养物中制备化合物CJ-13982的方法。

本发明的化合物CJ-13982的制备方法，其特征在于，所述的CJ-13982是从稻黑孢(Nigrospora oryzae)A8的发酵培养物中分离制备得到的，所述的稻黑孢(Nigrospora oryzae)A8，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011412。