[发明专利]一种鉴别烟草品种的SCAR标记引物及其方法

权利要求书

1.一种鉴别烟草品种的SCAR标记引物，其特征在于：采用RAPD对12个烟草品种进行分析，得到6条特异片段，基于6条特异片段核苷酸序列设计6对SCAR引物，所述12个烟草品种为红花大金元、K326、NC102、NC297、云烟85、云烟87、云烟97、中烟100、翠碧1号、KRK26、龙江911和南江3号，所述6对SCAR引物分别为：

S1-F：GTCCACACGGGGCAATTAATG/

S1-R：GTCCACACGGCTATGAGATTA，PCR产物大小为545bp；

S2-F：CACGGCTGCGTGTTATGAAC/

S2-R：CACGGCTGCGAAGAGCTAAG，PCR产物大小为733bp；

S3-F：CAATCGCCGTAAATACACAAAGTA/

S3-R：AATCGCCGTCAGGAGAGAGA，PCR产物大小为887bp；

S4-F：CCACAGCAGTAACAGCAGGA/

S4-R：CCACAGCAGTCTGATATTGGATG，PCR产物大小为313bp；

S5-F：AGGCTGTGCTATTGTAGGATGAGAC/

S5-R：AGGCTGTGCTTACTGCTTCTAC，PCR产物大小为555bp；

S6-F：TTTGAGAATACGTCTTAACGACCA/

S6-R：CCACAGCAGTCCCTTCCTAA，PCR产物大小为1760bp。

2.根据权利要求1所述的鉴别烟草品种的SCAR标记方法，其特征在于：利用CTAB法提取12个烟草品种基因组DNA，采用6对引物分别对12个烟草品种基因组DNA进行PCR扩增，通过6张SCAR图谱的分析，建立12个烟草品种的分子ID，根据分子ID的不同，将12个烟草品种逐一鉴别，所述PCR扩增20μL反应体系为：50ng/μLDNA模板0.7μL，10×PCRBuffer 2μL，25mmol/L MgCl₂ 1.6μL，10mmol/L dNTP 1μL，10μmol/L上下游引物各0.5μL，5U/μL Taq 0.5μL，ddH₂O 14.2μL，所述12个烟草品种的分子ID为：红花大金元：011001；K326：010001；NC102，011000；NC297，100100；云烟85，110101；云烟87，010101；云烟97，010110；中烟100，110011；翠碧1号，101011，KRK26，110111；龙江911，100010；南江3号，100101。