[发明专利]一种用于棕色蘑菇液体菌种培养的培养基质及其配方

说明书

技术领域

本发明提供了涉及棕色蘑菇的培养方法，更具体的说是一种用于棕色蘑菇液体菌种培养的麸皮发酵培养基质及其培养方法。

背景技术

棕色蘑菇（Agaricus brunnescens Peck），是蘑菇中的珍稀类品种，属于担子菌纲(Basidiomycotina)、伞菌目(Agaritales)、蘑菇科(Agaricaceae)、蘑菇属 (garicus)。棕色蘑菇俗称棕蘑，是波希美亚种。该菌株产量高、菇质优良、口感鲜嫩，其菇盖为自然棕褐色，菌柄白色，肉质致密紧实。现在所有的白色双孢蘑菇品种均为棕色蘑菇的白色变种，也就是说棕色蘑菇是白色双孢蘑菇的野生祖先。棕色蘑菇,别名白蘑菇、洋菇,属于担子菌纲、伞菌目、蘑菇科、蘑菇属。棕色蘑菇营养丰富、味道鲜美,据报导鲜蘑菇含蛋白质3%—4%,脂肪0.2%—0.3%,碳水化合物2.4%—3.8%,可消化率达70%—90%,享有“植物肉”之称。蘑菇的氨基质酸组成较全面,尤其富含人体必需的赖氨酸等。棕色蘑菇还含有丰富的铁、钾、钙等矿质元素。还含有硫氨素、核黄素、烟酸、抗坏血酸等多种维生素及酶类。由于含有较高的不饱和脂肪酸,故多食用蘑菇对降低血脂有明显作用,用蘑菇罐头加工预煮液制成的药物对医治迁延性肝炎、慢性肝炎、肝肿大、早期肝硬化等均有显著疗效。随着人们追求天然、返璞归直潮流的到来，棕色蘑菇在市场上受到广大消费者的追捧，是一个很好的商业品种。

目前，棕色蘑菇菌种培养主要采用固体培养方法，制作周期长，加上其制作时间正值高温季节，导致生产成本上升。而液体培养是采用液体基质质发酵来进行发酵培养菌种的生产，其原理是：在发酵罐或三角瓶中，采用液体培养基质，通入无菌空气加以搅拌或振荡，增加培养基质中的溶氧含量，提供菌丝体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，使得菌体在液体深处繁殖发育，获得大量的菌丝体或代谢产物。

“液体-麦粒菌种”是以液体菌种为种源制作的麦粒菌种。一般的麦粒菌种要用麦粒培养物做种源，制种所需时间较长。采用现代发酵技术制备液体菌种，能使蘑菇菌丝体细胞迅速分裂，因而制种时间比麦粒菌种要快很多。但是液体菌种不适合直接接种在大批量的堆肥培养料上，因为保存和运输均不方便。为扬其长而避其短，采用液体菌种作为种源生产麦粒菌种，兼具液体菌种和麦粒菌种的优点，能缩短制种时间，菌龄一致，提高了菌种质量，且生产成本低，接种简便，放大容易。

发明内容

本发明公开一种用于棕色蘑菇液体菌种培养的培养基质，其特征在于它是由麸皮发酵培养基质(g/L)成分组成：麸皮 120，葡萄糖 15，蛋白胨 2。

本发明所述的培养基质培养棕色蘑菇菌丝方法，其特征在于：

（1）种子液的制备，取5块0.5 cm²新鲜斜面菌种接种于种子培养基质（50mL/250mL三角瓶）中，25℃，150rpm摇床培养3天；其中的斜面培养基质：草炭土培养基质(g/L)：草炭土600g，葡萄糖20g，麦粒100g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾1g，蛋白胨2g，水1000mL；种子培养基质（g/L）：马铃薯200、葡萄糖 20、蛋白胨 2、磷酸二氢钾 2、硫酸镁 1、VB₁ 0.01，水1000mL，pH自然；

（2）液体菌种的制备，以10%（v/v）接种量将种子液移入装50mL麸皮发酵培养基质(g/L) ：麸皮 120，葡萄糖 15，蛋白胨 2；的250mL三角瓶中，25℃，150rpm培养7天，即得棕色蘑菇液体菌种；

（3）发酵条件：再以10%的接种量转到发酵罐培养，发酵罐容积7 L，装培养液4 L，培养温度25 ℃，在通风量为100 L/h，搅拌转速为200 r/min，pH 值不调节，发酵5天结束，进行测定；其中的麸皮发酵培养基质(g/L) ：麸皮 120，葡萄糖 15，蛋白胨 2；

（4）称重：采用细胞干重法：取50mL发酵培养液，3000r/min离心20 min，收集菌丝球，并用蒸馏水洗涤3次后，将菌丝体置于80℃下烘至恒重，称量，测定菌丝干重。棕色蘑菇的菌丝量由1.543 g/L提高到32.043g/L。发酵罐验证试验中菌丝干重最高达到38.486 g/L。

本发明选用的棕色蘑菇MC441菌株主要优特点是：