[发明专利]一株用于防治苏门白酒草的小孢茎点霉

说明书

技术领域

    本发明涉及农业杂草的生物控制技术领域，特别是涉及用对农业杂草有很强致病作用和控制效果的病原微生物作为环境友好型生物除草剂，具体是一株用于防治苏门白酒草的小孢茎点霉。

背景技术

苏门白酒草原产于南美洲，19世纪中期引入中国，近年来苏门白酒草生长迅速，繁殖速度快，产生大量的种子，分布广泛（特别是长江沿岸地区），在它们生长的周围，几乎看不到本地植物生长，特别是“破土”的地方，由于原有的植被受到破坏，这种植物乘虚而入，抢先生长，形成生长优势，不仅造成大田粮食作物大量减产，影响经济结构和社会稳定，而且由于其大量生长在长江流域一带，很容易引发生态安全，造成严重的后果，是典型的恶草，现阶段国内对苏门白酒草的研究较少,主要集中于对其形态特征、发生特点与危害等生物学和生态学特性及防除对策等方面，而国外对苏门白酒草的研究多集中于黄菊属植物的系统进化、 生殖繁育特征和光合生理特性及遗传学等方面。我国防除苏门白酒草的措施主要是人工拔除和使用草甘膦等化学除草剂，人工除草费工费时且难以达到理想的效果，而过多地使用化学除草剂会造成环境污染和残留问题 (娄远来等，2002)。

苏门白酒草在我国的发生区域仍然在不断扩大，危害和造成的经济损失越来越严重。因此，寻求对这种恶性杂草有强致病性和生防控制作用的病原微生物，由此进一步研制无残留、不污染环境的生物除草剂，将不仅能安全有效地控制苏门白酒草的为害，以避免由此造成的巨大经济损失，而且具有重要的商业开发应用价值。

发明内容

    本发明的目的是提供一株用于防治苏门白酒草的小孢茎点霉，该真菌菌株对苏门白酒草有很强的致病作用和控制效果。根据形态学特征和基于“内转录间隔区”基因(ITS)的分子生物技术将其鉴定为小孢茎点霉(Phoma microspora)，通过生物学特性试验测定确定了它生长产孢和侵染致病的最适条件，并对其构建了系统亲缘性进化树，研究发现其通过产生毒素使杂草植株发病死亡的致病机理，分析了病菌及其毒素的寄主专化性。

1.小孢茎点霉SMBC22菌株分离纯化和筛选：在重庆不同季节多次采集苏门白酒草自然发病植株，采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，经室内组织培养和纯化得到不同类型的真菌，用柯赫氏证病方法确定其中的致病菌，最后经过致病性试验比较筛选获得这种对苏门白酒草具有很强致病作用的杀草病原真菌(SMBC022菌株)。

2.SMBC022致病菌株的形态特征(图1)鉴定：将分离得到的强致病性病原菌smbc022接种到PDA平板上培养，长成的菌落呈圆形或近圆形，边缘整齐，轮纹状生长，后期同心轮纹隆起较明显。表面菌丝白色，菌落较薄，气生菌丝不发达，绒状，3天内菌落基部为白色，3天后部分逐渐转变成黑褐色，最终基部形成黑灰相间的纶纹状。菌落适宜生长温度为15-30℃，最适生长温度为28℃。菌丝无色，分枝，具隔，宽3.1-4.6μm，菌落在PDA培养基上光暗12h/12h下培养12d左右产孢。分生孢子器黑色，散生、埋生或半埋生于培养基中，球型或近球形，直径72～140μm，顶端有孔，产孢方式为瓶梗式。分生孢子椭圆形或卵形，无色，单胞，部分细胞中部有溢缩，大小为（4.5～5.8）μm×（1.6～2.1）μm，有1-2个油球。根据Sutton（1980）和 Boerema et al.(2004)的分类系统，参考相关的资料将该病原菌初步鉴定为小孢茎点霉。