[发明专利]一种突变的免疫球蛋白-结合蛋白

权利要求书

1.一种能够结合于免疫球蛋白分子的除互补决定区(CDR)之外的其它区域的免疫球蛋白-结合蛋白，其中SEQ ID NO.1或2所定义的亲本免疫球蛋白-结合蛋白或其功能性变体的至少一个天冬酰胺残基，已经突变为除了谷氨酰胺之外的其它氨基酸，与亲本分子相比，该突变赋予了在碱性pH值下的提高的化学稳定性。

2.根据权利要求1的蛋白，它是Fc片段-结合蛋白。

3.根据权利要求1或2的蛋白，其中所述的突变选自由N23T；N23T和N43E；N28A；N6A；N11S；N11S和N23T；以及N6A和N23T组成的组；并且其中亲本分子含有SEQ ID NO.2定义的序列。

4.根据前述任意一项权利要求的蛋白，其中位置23处的天冬酰胺残基已经突变，优选地突变为苏氨酸残基。

5.根据前述任意一项权利要求的蛋白，其中位置43处的天冬酰胺残基也已经突变，优选地突变为谷氨酸残基。

6.一种包含前述任意一项权利要求的突变蛋白单元的多聚体，其含有两个或多个重复单元。

7.根据权利要求6的多聚体，其中所述的蛋白单元通过最高包含大约15个氨基酸的元件来连接。

8.根据权利要求6或7的多聚体，它也含有一个或多个葡萄球菌蛋白A的E、D、A、B和C结构域。

9.根据权利要求6-8中任意一项的多聚体，它是四聚体。

10.根据权利要求9的多聚体，其中每一蛋白单元为SEQ IDNO.2定义的蛋白并且另外含有突变N23T。

11.一种编码权利要求1-10中任意一项的蛋白或多聚体的核酸。

12.一种表达系统，其含有权利要求11的核酸。

13.一种用于亲和层析的基质，其中多个含有权利要求1-5中任意一项的免疫球蛋白-结合蛋白的配体已偶联于固相载体上。

14.根据权利要求13的基质，其中所述的配体含有一个或多个权利要求6-10中任意一项的多聚体。

15.根据13或14的基质，所述的其中配体已通过硫醚键偶联于载体上。

16.根据权利要求13-15中任意一项的基质，其中所述的载体是一种天然的聚合物质，例如多糖。

17.根据权利要求13-16中任意一项的基质，其提供了对选自由IgG、IgA和IgM组成的组，优选IgG的免疫球蛋白的选择性结合。

18.根据权利要求13-17中任意一项的基质，在通过间歇式碱洗的两次或更多次分离过程中，其中，所述的配体具有高于亲本蛋白分子的结合容量。

19.根据权利要求18的基质，其中所述的碱洗用NaOH来进行，并且其浓度最高为大约1M，例如大约为0.5M。

20.一种分离免疫球蛋白，例如IgG、IgA和/或IgM的方法，其中使用权利要求1-10中任意一项的突变体蛋白或多聚体或权利要求13-19中任意一项的基质。

21.一种层析方法，其中通过吸附于权利要求1-10中任意一项的突变体蛋白或多聚体或权利要求13-19中任意一项的基质来从液体中分离至少一种靶化合物。