[发明专利]一种提取河蟹绒毛DNA的方法

权利要求书

1.一种提取河蟹DNA的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)剪取河蟹绒毛；

(2)提取河蟹绒毛DNA，步骤如下：

a.将第(1)步剪取的河蟹绒毛加裂解缓冲液和蛋白酶K进行消化，其中裂解缓冲液的成分与浓度为：0.05M EDTA，2％SDS，0.01M Tris-Cl，0.3M乙酸钠，10mg/ml DTT；

b.将步骤a得到的消化液离心，取上清液加饱和NaCl溶液和氯仿，混匀；

c.离心，取上清液加入异丙醇；

d.离心沉淀DNA；

e.洗涤DNA，轻摇混匀；

f.离心，将沉淀DNA烘干；

g.在烘干后的DNA加去离子水或TE溶液，并加入RNA酶去除DNA中的RNA，保存备用。

2.根据权利要求1所述的提取河蟹DNA的方法，其特征在于：第(1)步中，在剪取河蟹螯足上的绒毛的过程中剪取靠近基部毛囊部的绒毛。

3.根据权利要求1所述的提取河蟹DNA的方法，其特征在于：在步骤a中，河蟹绒毛的根数与加裂解缓冲液和蛋白酶K的量之间的关系是：河蟹绒毛15-20根，加500ml裂解缓冲液和浓度为20mg/ml的蛋白酶K 20μL，于56℃的的烘箱中过夜消化，直至澄清的裂解缓冲液转变为混浊呈橙黄色为止。