[发明专利]使用NK细胞增效化合物提高治疗性抗体功效的方法和组合物

说明书

技术领域

本发明总体上涉及提高治疗性抗体功效的方法和组合物。更具体而言，本发明涉及治疗性抗体与阻断自然杀伤细胞的抑制性受体或刺激自然杀伤细胞的活化受体的化合物的联合使用，从而使得哺乳动物患者的自然杀伤细胞的细胞毒性效用增强，尤其是通过提升ADCC机制以增强在人类患者中的治疗功效。 

背景技术

人类的许多治疗方案都是建立在使用治疗性抗体的基础之上。这些包括，例如使用已开发的治疗性抗体来使靶细胞衰竭，特别是病态细胞如病毒侵染的细胞、肿瘤细胞或其它病源细胞。这些抗体是典型的IgG类的单克隆抗体，典型的是具有人IgG1或IgG3 Fc部分。这些抗体可以是天然抗体或重组抗体，并且通常是″人源化″的小鼠抗体(即，包括来自各种物种的功能域，典型的是人或非人灵长类的Fc部分、并带有小鼠源的可变区或互补决定区(CDR))。可选替代的是，该单克隆抗体可以在具有人Ig位点的转基因的小鼠中通过免疫作用而完全人源化，或通过由衍生自人类细胞的cDNA文库获得。 

该治疗性抗体的一个特殊的例子是利妥昔单抗(rituximab)(美罗华 )，它是一种由人γ1和K恒定区(因而带有人IgG1 Fc部分)与带有CD20特异性的鼠可变区连接成的嵌合 抗-CD20单克隆抗体。在过去的几年中，利妥昔单抗已经极大地改变了对B淋巴细胞增生性癌变，尤其是非霍奇金淋巴瘤(NHL)的治疗方案。人源化的IgG1抗体的其它例子包括用于治疗B细胞恶性肿瘤(癌变)的阿来组单抗(alemtuzumab) 和用于治疗乳腺癌的曲妥珠单抗(trastuzumab) 开发中的治疗性抗体的其它例子正在本领域中出现。 

治疗性抗体的作用机制仍然是一个争论的话题。注入抗体，导致带有被该抗体特异性识别抗原的细胞的衰竭。该衰竭作用可以通过至少3种机制来介导：抗体介导的细胞毒性(ADCC)、补体依赖型溶解、和通过作为抗体靶标的抗原给出的信号对肿瘤生长的直接抗肿瘤抑制。 

尽管这些抗体代表了一种人类治疗，尤其是对于治疗肿瘤，的全新和有效的方法，但是它们并不都具有很强的疗效。例如，尽管利妥昔单抗单独施用(给予)或与化疗药物联合施用(给予)显示出对于治疗中低度和高度NHL有效，但是30％至50％的低度NHL患者对于利妥昔单抗没有临床反应。有人提出淋巴细胞表面上的CD20表达水平、治疗期间存在的高肿瘤负荷、或血清中利妥昔单抗的低浓度可以解释为什么在一些患者中利妥昔单抗没有疗效。然而，治疗失败的实际原因在很大程度上仍然是未知的。 

另外，由于施用治疗性抗体的副作用，使得治疗性抗体的使用受到了限制。例如，在患者中出现的发热、头痛、恶心、低血压、哮喘、皮疹、感染和许多其它可能出现的副作用潜在地限制了施用抗体的可能剂量或频率。 

因此，提高治疗性抗体的疗效或者能够减少抗体的使用剂量来实现疗效从而尽量减少可能产生的副作用，是令人感兴趣的。本发明将着手解决这些问题及其它需要。 

发明内容

本发明披露了增强治疗性抗体功效的新方法。无须受下述理论的限制，我们认为使用本发明方法所得到惊人的结果是由于：当注入治疗性抗体时，它们在体内能够强化ADCC机制。实际上，本发明提供的全新的组合物和方法能够克服目前与治疗性抗体疗效相关的困难。在本发明中可以看到来自个体的NK细胞由于缺少NK细胞的活化，即通过在抑制NK细胞上的抑制受体，而具有很差的治疗性单克隆抗体(mAb)介导的ADCC。优选地，ADCC机制的提高是通过施用阻断在自然杀伤细胞上的抑制受体或刺激在自然杀伤细胞上的活化受体的化合物，从而促进哺乳动物患者增强自然杀伤细胞的细胞毒性作用来实现的。优选的化合物是抗体或其片段。 

所述抗体或其它化合物可以与NK细胞的抑制性受体(例如杀伤细胞抑制性受体(KIR或NKG2A/C)分子进行反应，或与其活化受体(例如NK细胞上的NKp30、NKp44或NKp46这样的NCR)反应，从而中和细胞的抑制作用并且增加了其ADCC活性。 

更具体而言，本发明披露了治疗患者的方法，其中阻断NK细胞抑制性受体或刺激其活化受体的化合物，优选是抗体或其片段，与治疗性抗体联合施用于患者。本文中发明人证明了治疗性抗体通过如共注射方式与优选为抗体或其片段的这类化合物联合施用，通过例如阻断NK细胞的抑制性受体或刺激NK细胞的活化受体而克服了NK细胞的抑制，从而可以极大地增强其治疗功效。