[发明专利]一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取重金属的方法，特别涉及一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法与应用。该方法是一种简便、高效、准确的检测方法。

背景技术

近年来，我国的经济有了飞速的发展，但与此同时所引发的环境污染也愈加明显，特别是工业和加工制造业带来的大气、水体、土壤的重金属污染。水体、土壤及农田的重金属污染是造成蔬菜、水果及粮食等农产品中重金属含量超标的最主要原因。

重金属铜、铅、镉主要是通过食物和呼吸进入人体。虽然农产品中重金属一般情况下不会造成人们急性中毒，但重金属通过食物链在人体内蓄积，进而影响人体健康。面对越来越严峻的环境污染所引发的食品，特别是农产品的安全问题，对人民群众的健康产生了不利影响以及潜在的风险。建立一种快速、简捷、高效和安全的食品中重金属的检测技术迫在眉睫。

近年来，免疫学检测技术已广泛应用于毒素、杀虫剂、炸药等领域的检测。随着免疫学检测技术在重金属检测上的日臻成熟，ELISA试剂盒已成为了一种快速、简便和可靠的检测手段，其应用解决了传统检测技术检测需要大型分析仪器、仪器价格昂贵、操作繁琐、要求检测人员具备一定的专业知识等弊端。它可以代替传统检测技术适应企业质控和产品检验、产品的现场抽查及产品进出口的快速通关的要求。

本课题组已经成功制得了重金属铅的酶联免疫试剂盒，可以检测环境水样中的铅离子。已将其申请专利，申请号为“201010539824.8”、申请名称为“一种快速检测重金属铅离子的免疫学方法与试剂盒”。镉离子和铅离子的胶体金试剂条已制备成功，可以成功检测液态的重金属离子。已有的研究成果表明，ELISA重金属检测方法只能检测液态离子态的重金属，无法检测结合态的重金属。因此，要将ELISA重金属检测方法高效、快速地应用于实际工作中，还需解决重要但繁琐的样品前处理技术的问题。目前，农产品及食品中重金属的前处理技术有湿法消化法、干法灰化法和微波消解法，均是破坏有机质，将样品转变为液态澄清溶液进行测定。这些前处理技术虽然能准确提取样品中的重金属，但费时、费力且产生大量有害气体，获得的消解液具有强酸性，而ELISA中的酶免反应需要在一个温和的环境(中性至偏弱碱性)下进行，所以传统的样品前处理方法得到的消解液无法直接应用于ELISA检测重金属。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法。

本发明的另一目的在于提供所述检测碳水化合物类农产品中重金属的方法的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法，包括以下步骤：

(1)样品的前处理：将碳水化合物类农产品洗净、匀浆，加入稀酸浸提；接着去除不溶性物质，得到含有重金属离子的待测样品溶液；

(2)将待测样品溶液直接用于酶联免疫吸附反应(ELISA)，得到待测样品中重金属含量。

步骤(1)中所述的碳水化合物类农产品为蔬菜类农产品、水果类农产品或粮食类农产品；

所述的蔬菜类农产品优选为菜心、胡萝卜及南瓜；

所述的水果类农产品优选为苹果、葡萄及香蕉；

所述的粮食类农产品优选为大米、小麦及糙米；

步骤(1)中所述的稀酸指的是浓度小于6mol/L的酸；优选浓度为1～4mol/L的酸溶液；更优选为2～4mol/L；

所述的酸溶液优选为HCl溶液、HNO₃溶液或H₂SO₄溶液；

步骤(1)中所述的浸提的条件优选为4～70℃浸提10～20min；

所述的去除不溶性物质的方式优选为离心；

所述的离心的条件优选为4000～8000rpm离心15min；更优选为10000～13000rpm离心10min；

步骤(1)中所述的重金属离子优选为铜离子、铅离子或镉离子；

步骤(2)中所述的酶联免疫吸附反应优选为间接竞争ELISA检测方法；

所述的间接竞争ELISA检测方法的过程如下：

①包被：用碳酸盐缓冲液溶解重金属-螯合剂-蛋白质复合物，将其包被于酶标板微孔；

②洗板：甩干板孔中液体，然后向孔中加入PBS-T洗涤液，放置，再轻轻晃动，弃去洗液，拍干，重复洗板三次；

③封闭：用含有脱脂奶粉的PBST缓冲液封闭；如前法洗板三次；