[发明专利]前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于酶联免疫测定试剂盒，具体的涉及一种前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒。

 

背景技术

前列腺素是血管内皮细胞花生四烯酸代谢的主要产物，前列腺素F2α（以下简称PGF2α）对生殖、循环、呼吸系统具有广泛作用。其中对生殖系统的作用为：对妊娠各期子宫都有收缩作用，以妊娠晚期子宫最为敏感；对循环、呼吸系统系统的细胞的生理和病例性变化也有作用。

 

发明内容

本发明的目的在于提供一种前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒，包括：

1）已包被PGF2α-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；

2）明胶；

3）PGF2α标准品，4℃保存；

4）抗体PGF2α-IgG，4℃保存；

5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物，-20℃保存；

6）邻苯二胺；

7）稀释液，用前用蒸馏水作1:20稀释；

8）底物液，用前用蒸馏水作1:5稀释。

本发明的检测原理如下：

抗原（PGF2α-BSA）包被固相载体，与游离抗原（标准品或待测样品）竞争性地与一定量得抗体结合，洗涤后加过量酶标抗体，再加底物显色。根据显色程度（OD值）即可从标准曲线上推算出待测样品PGF2α含量。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合具有良好的特异性，可有效测定人和动物的血浆、血细胞、体液或组织中PGF2α的浓度；

2、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合在生殖、循环、呼吸系统中的鉴别诊断灵敏度高，可保证良好的线性关系；

3、本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒合在-20℃条件下可可保存6个月。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术技术方案，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例。

 

具体实施方式

一种前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒，其包括：

1）已包被PGF2α-牛血清白蛋白连接物酶标板，-20℃保存；

2）明胶， 1g/瓶；

3）PGF2α标准品，1600pg/ml，4℃保存；

4）抗体PGF2α-IgG， 1ml，滴度1:2000，4℃保存；

5）羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物（GARIgG-HRP），100ug/ml，-20℃保存；

6）邻苯二胺（OPD），15mg/瓶；

7）稀释液（PBS），0.2M，用前用蒸馏水作1:20稀释；

8）底物液（Buffer2），0.1M，用前用蒸馏水作1:5稀释。

利用本发明的前列腺素F2α酶联免疫测定试剂盒的检测步骤如下：

1、一次反应

将PGF2α标准品用0.1%明胶倍比稀释成8个浓度：1.25、2.5、5、10、20、40、80和160 pg/0.1ml，用0.1%明胶（PBS配制）将抗PGF2α-IgG作1:10稀释。

零标准（B0）孔加稀释液100ul，标准（ST）孔加PGF2α标准品100ul，样品（SMP）孔加待测样品100ul。

各孔均加抗体PGF2α-IgG100ul（TA孔除外）。

37℃ 2hr或室温下4hr。

tween-PBS稀释液洗板5次。

2、二次反应

用0.1%明胶（稀释液配制）12ml将GARIgG-HRP稀释，各孔均加200ul（TA孔除外）。37℃ 2hr或室温下4hr。

tween-PBS洗板5次。

3、反应测定

用底物液新鲜配制OPD-H₂O₂基质（OPD浓度1mg/ml，每毫升底物液中加入0.5微升30% H₂O₂），每孔注入200ul。

37℃放置20min或至显色较好时，用3M硫酸50ul终止反应。

置室温10min，在酶标检测仪上测定OD₄₉₀，以TA孔调零。

4、计算