[发明专利]一种快速检测枯草芽孢杆菌的引物及其检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201110424084.8 | 申请日： | 2011-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN102533981A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 张红发;任婧;刘景;游春苹;顾瑾麟 | 申请（专利权）人： | 光明乳业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 201103 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 枯草 芽孢 杆菌 引物 及其 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的引物对，其特征在于，该引物对中，一条引物和枯草芽孢杆菌16s-23s rRNA的基因序列相同，引物长度为15-30bp，另一条引物和枯草芽孢杆菌16s-23s rRNA的基因序列互补，引物长度为15-30bp，该引物对的扩增片段长度为200-800bp。
2.如权利要求1所述的引物对，其特征在于，一条引物的序列如SEQ ID NO.1所示，另一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种检测枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如权利要求1或2所述的引物对。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括dNTP，10×PCR缓冲液和Taq DNA聚合酶。
5.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括阳性对照或者基因抽提试剂。
6.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
1)提取待测样品的基因组DNA；
2)以步骤1)所得的基因组DNA为模板，以权利要求1或2所述引物对进行PCR反应；
3)将步骤2)所得PCR反应产物进行电泳检测，具有权利要求1或2所述引物对扩增出的片段的样品中存在枯草芽孢杆菌。
7.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的检测方法，其特征在于，步骤1)所述的待测样品为乳制品。
8.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的检测方法，其特征在于，步骤2)所述的PCR反应体系中包括0.5mmol/L的上游引物，0.5mmol/L的下游引物，0.2mmol/L的dNTP，1×PCR buffer，1.5mmol/L的Mg2+，0.02U/μL 的Taq DNA聚合酶，1.0-2.0ng/μL的DNA模板。
9.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的检测方法，其特征在于，步骤2)所述的PCR反应程序为：95℃，5min；30个循环95℃30S，55℃30S，72℃30S；72℃，5min；4℃保存。
10.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的检测方法，其特征在于，步骤3)所述的电泳检测中，采用序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示引物对的PCR反应产物，若有469bp核酸片段，则说明待测样品中存在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于光明乳业股份有限公司，未经光明乳业股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110424084.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：C轴回转旋转机构
- 下一篇：用于检测运动物体的运动状态的检测装置、有轨列车
