[发明专利]用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜及其制备方法

权利要求书

1.一种用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜，其特征在于：由以下方法所得，在表面有二氧化硅胶体微球有序阵列的模板上涂覆生物材料溶液，固化成型后，分离模板和薄膜，对薄膜进行拉伸或不拉伸，得纳米多孔生物材料薄膜，其中，纳米多孔生物材料薄膜的材质为PS、PLGA、PLLA或PMMA。

2.一种制备权利要求1所述的用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）清洗模板载体，将载体放入盛有SiO₂纳米粒子单分散乙醇溶液的容器中，室温下静置5~7d，取出，得表面形成二氧化硅胶体微球的有序阵列硬模板；

（2）在模板表面涂覆生物材料溶液，使其渗入SiO₂微球孔隙中，溶剂挥发，薄膜成型，用2% v/v氢氟酸分离模板和薄膜，用1% v/v氢氟酸浸泡薄膜清除残余SiO₂微球，用纯水冲洗薄膜，晾干，得纳米多孔生物材料薄膜；其中，生物材料溶液为PS的甲苯溶液、PLGA的氯仿溶液、PLLA的二氯甲烷溶液或PMMA的N,N-二甲基甲酰胺溶液；

（3）去除纳米多孔生物材料薄膜边缘不平整处，在80~85℃的水浴中进行匀速拉伸纳米多孔生物材料薄膜，得到不同拉伸度的纳米多孔生物材料薄膜。

3.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（1）中，载体为载玻片，采用体积比3：1的浓硫酸和过氧化氢混合液，在80℃下中放置，清洗至气泡消失。

4.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（1）中，SiO₂纳米粒子的直径为200nm，SiO₂纳米粒子单分散乙醇溶液的质量体积浓度为5%。

5.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（1）中，SiO₂微球的有序阵列的长度为2~3cm。

6.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（2）中，PS的甲苯溶液、PLGA的氯仿溶液、PLLA的二氯甲烷溶液以及PMMA的N,N-二甲基甲酰胺溶液的w/v浓度分别为20%、10%、2%以及25%。

7.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（2）中，室温下，待溶剂基本挥发，材料成固体状，在真空干燥箱中60℃保温12h以上，使溶剂完全挥发，再放入80℃烘箱中固化2h，使薄膜成型。

8.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（2）中，1% v/vHF浸泡薄膜48h以上，每12h换液一次，使薄膜上没有残余SiO₂微球。

9.根据权利要求2所述的制备用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜的方法，其特征在于：步骤（3）中，不同拉伸度的纳米多孔生物材料薄膜的拉伸倍数为2~6倍。

10.权利要求1所述的用于诱导干细胞定向分化的纳米多孔生物材料薄膜在培养细胞和诱导干细胞定向分化中的应用。