[发明专利]制备胡芦巴皂苷B的方法

说明书

技术领域

本发明涉及制备胡芦巴皂苷B的方法，属于中药领域。

背景技术

胡芦巴为豆科植物胡芦巴Trigonella foenum-graecum L.的种子，为中国药典2000年版收载品种。中医主要用于治疗肾虚腰酸、阳痿、寒疝偏坠、胃寒痛以及寒湿脚气肿痛乏力等。近年来国内外均有报道用原生药粉治疗糖尿病收到较好疗效。如中国医学论坛报道：每日服25g胡芦巴，共服21天，可明显降低病人的尿糖及血糖含量。且正常人服100g葡萄糖后，再服100g胡芦巴，可有效地防止血糖升高。国外文献报道：将10例非胰岛素依赖型糖尿病患者随机分为两组，治疗组每天在食物中混入25克胡芦巴粉。15天后两组进行交叉互换。在每次研究过程结束时(即第十五天)，进行静脉葡萄糖耐量试验。结果表明：食物中有胡芦巴粉者能提高代谢清除率，从而显著降低血糖水平，并缩短其半衰期，提高红细胞胰岛素受体数。由此可见，胡芦巴在临床上的疗效是肯定的。

专利申请号为03144071.1的“胡芦巴总皂苷提取物生产工艺”，该专利申请公开了“一种从植物胡芦巴中提取的胡芦巴提取物及其生产方法和在制备治疗糖尿病中对血糖和血脂有调节作用药品中的应用”，所获的总皂苷提取物皂苷部份为已知的甲基原薯蓣皂苷、甲基原翠雀皂苷等共五个皂苷的混合物，但是该申请中对于提取物的总皂苷的重量百分比是如何定义的，未作说明。如果没有用对照品，此重量百分比是没有任何意义。因此，制备对照品对于胡芦巴总皂苷提取物的生产工艺控制具有重要意义。胡芦巴皂苷B为总皂苷中的主要成分(含量为8％以上)之一，结构式如(I)所示，如果能够分离纯化得到高纯度的胡芦巴皂苷B，则可以作为胡芦巴总皂苷的对照品。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种制备胡芦巴皂苷B的方法。

本发明制备胡芦巴皂苷B的方法包括如下步骤：

a、胡芦巴总皂苷提取物的水溶液，过聚酰胺柱、碱性氧化铝柱、中性氧化铝柱或硅胶柱，用水洗脱柱子(优选洗脱至洗脱液振摇无泡沫或取1份洗脱液加入0.8～1.2倍体积的高氯酸不显红色为止，一般情况下，取1ml洗脱液加入1ml高氯酸进行判断即可)，收集合并洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，得到胡芦巴皂苷B粗品一。

其中，为了使制备的胡芦巴皂苷B的纯度更高，本发明方法的a步骤中的胡芦巴总皂苷提取物的水溶液优选过聚酰胺柱或碱性氧化铝柱。

其中，本发明方法的a步骤中，胡芦巴总皂苷提取物的水溶液，优选先过碱性氧化铝柱，所收集合并的洗脱液再过聚酰胺柱，收集流出液，流出液再进行浓缩、干燥操作。这样可以除去更多的酸性杂质，特别是那些能被氧化铝吸附而不被聚酰胺吸附的杂质，如色素、黄酮等。

其中，本发明方法的a步骤中，胡芦巴总皂苷提取物的水溶液中的胡芦巴总皂苷提取物浓度只要能够使其中的胡芦巴皂苷B能够完全被吸附即可，但是，如果浓度过低，则吸附时间过长，影响生产效率；如果浓度过高，需要多吸附几次，同样会影响生产效率，因此，为了提高生产效率，本发明方法的a步骤中所述的胡芦巴总皂苷提取物的水溶液中的胡芦巴总皂苷提取物浓度优选为70～130g/L。

其中，为了使制备的胡芦巴皂苷B的纯度更高，本发明方法优选还采用下述b步骤纯化胡芦巴皂苷B粗品一：

b、a步骤所得洗脱液过D101型大孔树脂柱，然后用水洗涤大孔树脂柱至洗涤液近澄明，再用75～85wt％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱醇液(优选收集洗脱醇液至洗脱醇液挥干后遇高氯酸不显色为止)，合并洗脱醇液，回收溶剂，得浸膏，所得浸膏为胡芦巴皂苷B粗品二。

其中，本发明方法的b步骤，洗脱的乙醇溶液浓度过高或过低都可能导致制备的胡芦巴皂苷B的纯度不高，用75～85wt％的乙醇溶液洗脱较为合适，优选采用80wt％的乙醇溶液洗脱。

其中，为了使制备的胡芦巴皂苷B的纯度更高，本发明方法优选还采用下述c步骤纯化胡芦巴皂苷B粗品二：

c、b步骤所得浸膏加水溶解，用正丁醇萃取，萃取液回收正丁醇，干燥，得到白色粉末，白色粉末即为胡芦巴皂苷B粗品三。

其中，本发明方法的c步骤中，采用正丁醇萃取时，其用量可以采用常规萃取剂的用量即可。如果只萃取一次，则可能不能完全将胡芦巴皂苷B萃取而出，从而影响胡芦巴皂苷B的收率，为了提高胡芦巴皂苷B的收率，本发明方法的c步骤中优选用正丁醇萃取4～6次，然后合并萃取液并回收正丁醇；其中，每次萃取的正丁醇与浸膏的水溶液体积比优选为0.7～1.3∶0.7～1.3。