[发明专利]一种高分子量鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法有效
申请号: | 201110427743.3 | 申请日: | 2011-12-20 |
公开(公告)号: | CN102676620A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 付万冬;钟明杰;廖妙飞;郑斌;杨会成;王维伦 | 申请(专利权)人: | 浙江省海洋开发研究院 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316100 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分子量 鱿鱼 胶原 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种高分子量鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法,其特征是,所述的制备方法包括下列步骤:
a.将鱿鱼皮解冻后用清水清洗干净并捣碎;
b.加入NaOH溶液在4-10℃下浸泡24-30 h;
c.再加入正丁醇溶液,搅拌16-24 h,用蒸馏水洗涤至pH为中性后沥干;
d.沥干后的鱿鱼皮中加入蒸馏水,搅拌均匀,加入蛋白酶对鱿鱼皮进行酶法水解;
e.选用分子截留量为100 kd的超滤膜对酶解液进行超滤;
f.收取步骤e中超滤膜上的截留物,冷冻干燥后便得到高分子量鱿鱼皮胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是,步骤b中所加NaOH溶液的浓度为0.1-0.5 mol/L,每克鱿鱼皮加30-50 ml的NaOH溶液。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征是,步骤c中正丁醇溶液中的正丁醇体积百分含量为10%-15%,每克鱿鱼皮加30-50 ml的正丁醇溶液。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是,步骤d中每克鱿鱼皮加10-20 ml的蒸馏水,所述的蛋白酶由枯草杆菌中性蛋白酶和胃蛋白酶组成,所述的酶法水解为先加入为鱿鱼皮重量1%-3%的枯草杆菌中性蛋白酶,在4-10℃下酶解6-10 h,再用盐酸调节PH为1-1.5,加入鱿鱼皮重量3%-5%的胃蛋白酶,在温度4-10℃下继续酶解16-20 h,酶解后在90-100℃下灭酶5-10 min。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是,对步骤e中的滤液进行盐析沉淀,将沉淀物进行冷冻干燥便得到低分子量鱿鱼皮胶原蛋白。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征是,所述的盐析沉淀为先用氨水调节滤液pH为4-6,再在滤液中加入中性盐直至其浓度为2-2.5 mol/L,使鱿鱼皮胶原蛋白盐析沉淀。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征是,所述的中性盐为硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠、氯化钾或氯化铵。
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