[发明专利]一种制备宝霍苷I纯品的方法

权利要求书

1.一种宝霍苷I纯品的制备方法，其特征在于：以淫羊藿苷为原料，葡聚糖酶水解及反相高效制备色谱纯化，即可获得纯度大于98％的宝霍苷I纯品；具体步骤如下：

1)葡聚糖酶水解：

将1-25mg淫羊藿苷用10-100ml柠檬酸缓冲溶液溶解，加入40-150ul、4-10ug/ul的葡聚糖酶水溶液，保持19-80摄氏度并搅拌3-6小时，获得宝霍苷I沉淀；

宝霍苷I沉淀经水洗除去部分酶和大部分葡萄糖，进一步用-4到4摄氏度冷甲醇溶解除去残余酶和不溶沉淀，上清液浓缩干燥即可得到宝霍苷I粗品；

2)反相高效制备液相纯化：

宝霍苷I粗品用甲醇溶解，经0.45um微膜过滤；通过微膜滤出的样品上样分析，采用C18反相填料制备色谱柱分离纯化，采用C18键合硅胶填料，采用体积浓度70-100％甲醇水溶液等度洗脱，采用紫外检测器检测，检测波长270nm，收集相应保留时间处馏分，浓缩干燥即得纯度大于98％的宝霍苷I纯品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：水解步骤中柠檬酸缓冲体系的PH值控制在4-7，水解时间控制在3-6小时，水解温度控制在19-80摄氏度。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：宝霍苷I纯品获得采用反相高效制备色谱柱，填料优选10-20um C18键合硅胶，柱效大于等于2500。