[发明专利]一种检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述试纸条由样品垫、含有彩色胶乳颗粒标记物的玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成，所述硝酸纤维素膜包括包被有甲型流感病毒抗体的检测区和包被有羊抗兔抗体的控制区，所述彩色胶乳颗粒标记物包括微信号放大系统和彩色胶乳标记兔IgG抗体，所述微信号放大系统为彩色胶乳颗粒-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体。

2.根据权利要求1所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述彩色胶乳颗粒-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体复合物的用量为32.5-60μg/cm²。

3.根据权利要求1所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述检测区包被的甲型流感病毒抗体用量为0.144-0.28μg/mm。

4.根据权利要求1所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述彩色胶乳标记兔IgG抗体的用量为20-40μg/cm²。

5.根据权利要求1所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述羊抗兔抗体为羊抗兔IgG抗体，所述羊抗兔抗体的用量为0.18-0.44μg/mm。

6.根据权利要求1所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条，其特征在于，所述彩色胶乳颗粒-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体复合物的用量为55-60μg/cm²，所述检测区包被的甲型流感病毒抗体用量为0.20-0.23μg/mm，所述彩色胶乳标记兔IgG抗体的用量为28-32μg/cm²，所述羊抗兔抗体的用量为0.30-0.36μg/mm。

7.一种制备权利要求1-6任一项所述的检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按常规方法制备甲型流感病毒抗体以及彩色胶乳标记兔IgG抗体；

(2)制备微信号放大系统

a、制备彩色胶乳标记亲和素

将待标记亲和素预先在0.001～0.01mol/L的NaCl溶液中透析过夜，离心，调节彩色胶乳液的pH值至7～8，标记亲和素以形成彩色胶乳标记亲和素；

b、按常规方法制备生物素化甲型流感病毒抗体，所述生物素与甲型流感病毒抗体的质量比为1∶9；

c、完成微信号放大系统

将步骤a得到的彩色胶乳标记亲和素和步骤b得到的生物素化甲型流感病毒抗体混合，所述彩色胶乳标记亲和素与生物素化甲型流感病毒抗体的用量比例为：1ml彩色胶乳标记亲和素溶液中加入100μl生物素化甲型流感病毒抗体，连接得到彩色胶乳-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体，洗涤，即得微信号放大系统；

(3)按稀释参数20cm²/ml～40cm²/ml，将步骤(2)的彩色胶乳-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体和彩色胶乳-兔IgG抗体喷洒到玻璃纤维膜上，干燥备用；

(4)用包被缓冲液稀释甲型流感病毒抗体，使其浓度为0.9mg/ml～1.4mg/ml，按膜液量0.16μl/mm～0.2μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥备用；

用包被缓冲液稀释羊抗兔抗体，使其浓度为1.0mg/ml～2.0mg/ml，按膜液量0.18μl/mm～0.22μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥备用；

(5)将样品垫、步骤(3)的玻璃纤维膜、步骤(4)的硝酸纤维素膜、吸水纸按序粘贴于底板上，即得。

8.根据权利要求7所述的制备检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条的方法，其特征在于，所述步骤(3)中彩色胶乳-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体复合物的用量为32.5-60μg/cm²，所述步骤(4)中硝酸纤维素膜上包被的甲型流感病毒抗体的用量为0.144-0.28μg/mm，所述彩色胶乳标记兔IgG抗体的用量为20-40μg/cm²，所述羊抗兔抗体的用量为0.18-0.44μg/mm。

9.根据权利要求7所述的制备检测分泌物中甲型流感病毒抗原的试纸条的方法，其特征在于，所述步骤(3)中彩色胶乳-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体复合物的用量为55-60μg/cm²，所述步骤(4)中硝酸纤维素膜上包被的甲型流感病毒抗体用量为0.20-0.23μg/mm，所述彩色胶乳标记兔IgG抗体的用量为28-32μg/cm²，所述羊抗兔抗体的用量为0.30-0.36μg/mm。