[发明专利]一种太子参脱毒组培繁育方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种太子参脱毒组培繁育方法。

 

背景技术

太子参为石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla (Miq.)Pax ex Pax et Hoffm.的块根。在夏季茎叶大部分枯萎时采挖，洗净，除去须根，置沸水中略烫后晒干或直接晒干。太子参历版《中华人民共和国药典》均予收载。太子参具有益气健脾，生津润肺的功能；临床用于脾虚体倦，食欲不振，病后虚弱，气阴不足，自汗日渴，肺燥干咳等症。太子参用量逐年递增，市场前景广阔。太子参是贵州省上世纪90年代从福建引种的药材之一，历年来在黔东南地区广泛种植。由于长期以太子参块根进行无性繁殖，太子参病毒病普遍发生,病害严重。经调查，该区域的太子参花叶病发病面积曾高达40%~50%；部分种植区发病率尚高达60%以上，这导致其产量逐年下降。目前报道太子参受侵染的病毒种类主要有：芜菁花叶病毒(Turnipmosaicvirus，TuMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)， 蚕豆萎蔫病毒(Broad beanwill virus，BBWV)和烟草花叶病毒(Tobacco mosaic uirus，TMV) 。

目前，获得无病毒植株的方法有多种，其相关技术已有许多专利，如CN100382679C（2008年4月23日授权《一种半夏脱毒组培快繁的方法》等披露了采用茎尖作为外植体，经茎尖组培后得到脱毒苗的方法。《福建农林大学学报》（自然科学版）2006年3月第35卷第2期报道了《太子参茎尖脱毒培养及增产效果》、《福建农业科技》2006年第5期报道了《脱毒太子参标准化高产栽培技术及其推广应用》。上述报道未揭示脱毒太子参的生产过程、接种污染力高、移栽成活率低，未提出解决病毒再次侵染的途径等问题。

 

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供了一种具有接种污染率低，成活率高，脱毒简便、快捷、彻底；繁殖系数高，块根抗逆性、产量和品质均增强的太子参脱毒组培繁育方法。

本发明的一种太子参脱毒组培繁育方法，包括如下步骤：

（1）单株的选择：在太子参生长旺盛期的4~5月选择株高10~20㎝；茎直立，近方形，分枝5~8个，略呈紫色；叶对生，色深绿，叶片宽卵形或卵状菱形，顶端渐尖，基部渐狭，上面无毛，下面沿叶脉疏生柔毛，顶部有2对大叶，形成十字形，无病害表现；花腋生或呈聚伞花序；蒴果宽卵形，具种子6~19粒的优良单株；

（2）外植体的选择：

块根芽头：在传统采收期采收优良单株中块根最大部位的直径在0.45㎝以上、数量在10粒以上的植株长出的芽头作为外植体；

种子：在传统采收期采收优良单株中块根最大部位的直径在0.45㎝以上、数量在10粒以上的植株收获的未成熟或成熟种子作为外植体；

（3）微茎尖：

块根芽头经洗涤消毒后，在无菌条件下培养，待芽长至2~3个节时在无菌环境下切取0.3~0.5㎜茎尖即得；

种子经洗涤消毒后，在无菌条件下培养，待芽长至2~3个节时在无菌环境下切取0.3~0.5㎜茎尖即得；

（4）增殖培养：

所需材料：经病毒检测后不含芫菁花叶病毒（Turnipmosaicvirus，TuMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）、烟草花叶病毒（Broad beanwill virus，BBWV）、蚕豆萎蔫病毒（Tobacco mosaic uirus，TMV）的微茎尖；

微茎尖增殖培养分为初代培养和继代培养，初代培养基配方为MS+BA0.5~2.0mg.L^-1+NAA0.1~0.5 mg.L^-1；继代培养基配方为MS+BA1.0~5.0 mg.L^-1+NAA0.1~0.5 mg.L^-1;

（5）生根培养：

微茎尖经增殖培养后进行生根培养，其培养基配方为1/2MS +NAA0.1~3.0 mg.L^-1；

（6）原种的生产：