[发明专利]一种样品中氨基丁酸的高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种样品中氨基丁酸的高效液相色谱分析方法，其特征在于，它包括以下步骤：

（a）将待衍生样品与NaH₂CO₃和衍生试剂2,4-二硝基氟苯进行衍生化反

应，得到可紫外吸收的衍生产物；

（b）对衍生产物进行高效液相色谱分析和紫外检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的衍生化反应是在500μl的待衍生样品中加入40-60μl的0.05mol/L的NaH₂CO₃溶液和100-300μl的质量百分数为0.2%的2,4-二硝基氟苯，40-60℃下反应30-50min，冷却，用甲醇-水定容至1ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的衍生化反应是在500μl的待衍生样品中加入50μl的0.05mol/L的NaH₂CO₃溶液和200μl的质量百分数为0.2%的2,4-二硝基氟苯，50℃下反应40min，冷却，用甲醇-水定容至1ml。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的甲醇-水是体积比为1:1的甲醇和水的混合溶液。

5.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的待衍生样品是大脑样品中加入甲醇-水，旋窝混合，超声提取，离心取上清，于上清中加入乙腈，混匀，离心，最终收集得到的上清液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色谱分析的条件是：色谱柱是C18柱，柱长250mm×内径4.6mm×粒径4-6μm；流动相A是体积比1:1的乙腈和水的混合液；流动相B是0.05M KH₂PO₄，pH=3.3-3.7；流速为0.8-1.2ml/min；柱温为30-40℃；进样量是20-40μl。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的色谱柱的粒径为5μm，所述的流动相B的pH是3.5，所述的流速为1 ml/min，所述的柱温为35℃，所述的进样量为30μl。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述的流动相B是用磷酸调节pH至3.3-3.7。

9.根据权利要求1、2或6所述的方法，其特征在于，所述的紫外检测的紫外波长是350nm。