[发明专利]新穿心莲内酯的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种新穿心莲内酯的分离纯化方法。

背景技术

新穿心莲内酯又名穿心莲丙素，新穿心莲素，穿心莲新甙。是从爵科植物穿心莲叶中分离出的二萜内酯类化合物。现代药理学表明新穿心莲内酯具有清热解毒，消肿止痛之功效。动物实验证明新穿心莲内酯具有抑制和延缓肺炎双球菌和溶血性乙型链球菌引起的体温升高的作用，亦具止咳平喘作用。适用于急性细菌性痢疾，急性胃肠炎，上呼吸道感染，急性扁桃发炎。有研究表明新穿心莲内酯对中暑的预防和防治具有积极的作用。新穿心莲内酯在临床上对细菌性痢疾的疗效较氯霉素与痢特灵为优，且无副作用和毒性。由于穿心莲药材中新穿心莲内酯的含量较少，目前穿心莲的深加工和开发利用主要是针对穿心莲内酯。随着研究的不断深入，高纯度的新穿心莲内酯的分离，必将拓展中药穿心莲在临床的应用。

新穿心莲内酯分子结构：

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穿心莲原料中，主要含有穿心莲内酯，新穿心莲内酯，去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯，其中穿心莲内酯含量最高，其次是新穿心莲内酯。新穿心莲内酯由于含量低，难与穿心莲内酯分离，因此研究较少。现有的新穿心莲内酯分离纯化方法大部分只停留在实验阶段，不能够有效分离提纯新穿心莲内酯，所得产物有效成分含量低，不能实现批量化的工业生产。目前公开的专利文献中，中国专利申请号2009101154260，名称为《穿心莲总内酯与新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯的生产工艺》发明专利申请，公开了新穿心莲内酯的一种生产工艺，其是先制备穿心莲总内酯，再从穿心莲总内酯中分离得到新穿心莲内酯。这种分离过程中，需要使用到三氯甲烷和丙酮等有毒的有机溶剂，不仅降低了产品的安全性，对生产工人的健康不利，而且产生的废液会污染环境，不利于环境保护。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种能够分离出重量含量95%以上高含量的新穿心莲内酯，可实施性强，可以实现工业化批量生产的新穿心莲内酯的分离纯化方法，该方法在整个分离纯化过程中，仅使用食用酒精一种溶剂，未使用其他任何有毒的溶剂，具有产品安全性高和生产操作更安全等优点，解决了上述现有技术中存在的问题。

解决上述技术问题的技术方案是：一种新穿心莲内酯的分离纯化方法，该方法包括以下步骤：

1）称量：称取穿心莲提取物；

2）酒精溶解：按1g穿心莲提取物加入25～35ml酒精计加入95%（体积）酒精，加热搅拌使穿心莲提取物溶解得到溶解液，加热温度为55～65℃；

3）活性炭除杂：加入穿心莲提取物重量1.5～2.5%的90～100目活性炭对步骤2）得到的溶解液进行吸附脱色除杂，除杂过程不断搅拌，温度控制在55～65℃，除杂时间为1～2小时；

4）过滤活性炭：用钛棒过滤器去除活性炭，收集滤液；

5）滤液上柱：步骤4）得到的滤液经柱子交换吸附除杂，柱子填充物料为大孔吸附树脂或硅胶；

6）洗脱：先用纯净水洗脱大孔吸附树脂或硅胶至流出液清亮为止，再用1.5～2.5倍柱体积的90%（体积）酒精进行洗脱，洗脱过程用硅胶薄层层析与穿心莲内酯、新穿心莲内酯标准品进行对照决定收集洗脱液的起始点，操作方法：点样于硅胶薄层板上，以氯仿：甲醇体积比为1：2为展开剂，展开，取出晾干后，置碘蒸汽显色，按照硅胶薄层层析的结果收集富含穿心莲内酯和新穿心莲内酯的洗脱液；                    

7）第一次浓缩结晶：将步骤6）得到的富含穿心莲内酯和新穿心莲内酯洗脱液在真空条件下浓缩至洗脱液初始体积的45～55%，真空度控制在0.06～0.08MPa，温度控制在45～55℃；静置浓缩液，自然冷却结晶，待有晶体析出后抽滤得晶体A；

8）酒精溶解晶体A：按1g晶体A加入25～35ml酒精计，加入95%（体积）酒精加热溶解晶体A，得到溶解液，加热温度为55～65℃；

9）第二次浓缩结晶：在真空度为0.06～0.08MPa，温度为45～55℃的条件下将步骤8）得到的溶解液浓缩至溶解液初始体积的60～70%，静置，自然冷却结晶，待有晶体析出后抽滤得柱状结晶，即为新穿心莲内酯结晶。

本发明的进一步技术方案是：步骤7）抽滤得晶体A后，将母液在真空条件下浓缩至母液初始体积的45～55%，真空度控制在0.06～0.08MPa，温度控制在45～55℃；静置浓缩液，自然冷却结晶，待有晶体析出后抽滤得晶体B，晶体B为穿心莲内酯结晶。