[发明专利]从毛白杨中分离的温和的组成型表达启动子及其应用

说明书

技术领域

发明涉及一种从植物中分离的启动子，尤其涉及从毛白杨(Populus tomentosa Carr.)中所分离的温和的组成型表达启动子及其编码的蛋白，本发明还涉及含有该温和的组成型表达启动子的重组植物表达载体以及宿主细胞，本发明进一步涉及它们在在构建转基因植物、培育植物新品种、建立植物生物反应器以及解析基因功能等方面的应用，属于植物组成型表达启动子的分离及其应用领域。

背景技术

启动子是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能够活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确结合并具有转录起始的特异性。启动子决定着转录的方向和转录的效率，同时对所使用的RNA聚合酶类型也起着决定性作用，是理解基因表达模式和转录调控机制的关键，是植物基因转录调控的中心。

按作用方式和功能，可将启动子分为组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子。目前在植物基因工程研究中，组成型启动子的应用最为广泛。组成型启动子控制的结构基因在所有组织部位中都能表达且表达水平没有明显变化，表达具有持续性，RNA和蛋白质表达量也相对恒定，不表现时空特异性，也不受外界因素的诱导。在双子叶转基因植物中使用最广泛的组成型启动子是花椰菜花叶病毒的CaMV35S启动子(Odell J T，Nagy F，Chua N H.Identification of DNA sequences required for activity of the cauliflower mosaic virus 35S promoter[J].Nature.1985，313(6005)：810-812；Mitsuhara I，Ugaki M，Hirochika H，et al.Efficient Promoter Cassettes for Enhanced Expression of Foregin Genes in Dicotyledonous and Monocotyledonous Plants[J].Plant and Cell Physiology.1996，37(1)：49-59)，单子叶转基因植物主要使用来自玉米的Ubiquitin启动子(Christensen A H，Sharrock R A，Quail P H.Maize polyubiquitin genes：structure，thermal perturbation of expression and transcript splicing，and promoter activity following transfer to protoplasts by electroporation[J].Plant Mol Biol.1992，18(4)：675-689.)和水稻的Actinl启动子(Mcelroy D，Zhang W，Cao J，et al.Isolation of an efficient actin promoter for use in rice transformation[J].Plant Cell.1990，2(2)：163-171.)，另外还有来自章鱼碱合成酶基因Ocs启动子和根癌农杆菌Ti质粒T-DNA区域的胭脂碱合成酶基因Nos启动子(Angenon G，Van Montagu M，Depicker A.Analysis of the stop codon context in plant nuclear genes[J].FEBS Lett.1990，271(1-2)：144-146.)。