[发明专利]一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用

权利要求书

1.一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母，为含有重组质粒的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，其特征在于，所述酿酒酵母的GAL1基因被GAL4基因替换；所述的重组质粒由酿酒酵母表达载体pGMAK和插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间的纤维素酶基因组成。

2.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述的纤维素酶基因为内切纤维素酶基因、外切纤维素酶基因或葡萄糖苷酶基因。

3.如权利要求1所述的重组酿酒酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将纤维素酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将所述酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。

4.如权利要求1或2所述的重组酿酒酵母在制备纤维素酶制剂中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：将所述的重组酿酒酵母接种于含稻壳粉和半乳糖的YPD培养基中进行发酵培养，发酵培养36～72小时后离心收集菌体，制得纤维素酶制剂。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，以重量百分比计，所述YPD培养基中稻壳粉的浓度为3-8％，半乳糖的浓度为0.5-2％。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的发酵培养时间为40-45小时。