[发明专利]通用ACTB基因荧光定量聚合酶链式反应试剂盒

权利要求书

1.一种操作简单、快速，能够有效定量扩增检测人、大鼠、小鼠的ACTB基因表达的DNA荧光定量体外扩增检测试剂盒；其中包含ACTB特异的引物、探针和耐热DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等组成的PCR扩增缓冲反应体系，以及标准ACTB模板。

2.根据权利要求1所述的通用ACTB基因荧光定量聚合酶链式反应试剂盒，其特征在于：所用引物和探针序列分别为：上游引物P1：5’-GAA GAT CAA GAT CAT TGC TCC T-3’(SEQ ID NO：1)；下游引物P2：5’-TGG ATC AGC AAG CAG GAG TA-3’(SEQ ID NO：2)；TaqMan探针序列：5’-FAM-CTG TCC ACC TTC CAG CGA-TAMRA-3’(SEQ ID NO：3)。

3.根据权利要求1所述的通用ACTB基因荧光定量聚合酶链式反应试剂盒，其特征在于：特异的引物和探针每条0.28umol/L、Taq DNA聚合酶1.5/50ul、dNTPs底物0.25mmol/L、模板cDNA若干、Mg²⁺2.5mmol/L、缓冲液1×PCR；其中1×PCR缓冲液包括50mmol/L KCl、10mmol/L Tris·HCl PH 8.3、0.01％明胶。

4.根据权利要求1所述的通用ACTB基因荧光定量聚合酶链式反应试剂盒，其特征在于：标准ACTB基因模板序列为：5’-GAAGATCAAGATCATTGCTCCTCCTGAGCGCAAGTACTCTGTGTGGATTGGTGGCTCTATCCTGGCCTCACTGTCCACCTTCCAGCAGATGTGGATCAGCAAGCAGGAGTA-3’(SEQID NO：4)；其浓度分别为10E+8/ML、10E+7/ML、10E+6/ML、10E+5/ML、10E+4/ML。