[发明专利]一种从柳叶腊梅中提取总香豆素类化合物的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及柳叶腊梅的有效成分的提取方法，具体涉及一种从柳叶腊梅中提取总香豆素类化合物的方法。

(二)技术背景

畲药是我国民族特色药物之一，在畲族中有着悠久的应用历史。浙南地区畲族百姓主要用于治疗伤食所致的痞满证和慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡引起的胃胀、胃痛、泛酸等。柳叶腊梅鲜叶可按茶叶炒青工艺制成茶冲泡饮用，也可炼制挥发油制成片剂、滴丸，用于镇咳、平喘、防治感冒和流行性感冒。柳叶腊梅具有抗菌、消炎、抗病毒，增强肌体免疫力等功能，无毒副作用，其市场及经济效益前景非常看好。

香豆素类化合物在医药方面的应用是广泛认可的，特别是6，7-二甲氧基香豆素，又称滨蒿内酯、二甲氧香豆素、七叶内酯二甲醚、蒿属香豆精和东喘宁，具有显著的降压作用及利胆、抗炎、镇痛、降血脂、平喘、抗凝等作用。临床上主要用于治疗心绞痛、心律失常、支气管哮喘等疾病。

然而目前国内外对柳叶腊梅的化学成分研究甚少，更未见关于上述化合物的同时分离的报道。一般柱分离等传统的分离方法不仅耗时，费力，而且高污染，高成本，高风险。

(三)发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从柳叶腊梅中提取香豆素类化合物的方法，该方法具有分离效果好、污染小、提取率高、产品纯度高、时间短、操作方便等优点。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种从柳叶腊梅中提取总香豆素类化合物的方法，所述的总香豆素类化合物为式1所示的6-甲基-7-甲氧基香豆素、式2所示的6，7-二甲氧基香豆素和式3所示的6，7，8-三甲氧基香豆素的混合物，所述方法包括如下步骤：

(1)取柳叶腊梅的枝干粉碎物，加入弱极性溶剂进行超声提取，然后过滤，取滤液浓缩、干燥得到柳叶腊梅初提物；所述弱极性溶剂选自下列一种或任意几种的混合：水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯；

(2)取体积比为1∶0.5～1.5∶0.5～2的氯仿、甲醇、水组成弱极性溶剂体系，将步骤(1)制得的柳叶腊梅初提物溶于弱极性溶剂体系中进行萃取，静置后分出下相，再将下相蒸干得浸膏状物；

(3)浸膏状物加入极性溶剂，滤去沉淀，得到总香豆素类化合物；所述极性溶剂选自下列一种或任意几种的混合：水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯；

本发明所述的柳叶腊梅的枝干粉碎物可以是柳叶腊梅枝干过筛(如过20目筛)后获得的柳叶腊梅枝干粉末。

进一步，步骤(1)中所述弱极性溶剂的用量以柳叶腊梅的枝干粉碎物的质量计为10～60mL/g。

进一步，步骤(1)所述的弱极性溶剂优选为水与甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的一种或任意几种组成的混合溶剂，混合溶剂中水的体积百分比为20～70％。

更进一步，步骤(1)所述的弱极性溶剂优选为体积百分含量为30～80％的甲醇水溶液或体积百分含量为30～80％的乙醇水溶液。

进一步，本发明推荐步骤(1)所述的超声提取条件为：超声时间为0.5～2小时，频率为20～300kHz。

本发明步骤(2)中，以氯仿、甲醇、水组成弱极性溶剂体系，上相主要为水层，下相主要为氯仿层。

进一步，优选所述的弱极性溶剂体系中，氯仿、甲醇、水的体积比为1∶0.8～1.25∶0.75～1.6。

更进一步，所述的弱极性溶剂体系的一个优选方案为：氯仿、甲醇、水的体积比为1∶0.8∶1.6。

更进一步，所述的弱极性溶剂体系的另一个优选方案为：氯仿、甲醇、水的体积比为1∶0.9∶1.05。

更进一步，所述的弱极性溶剂体系的再一个优选方案为：氯仿、甲醇、水的体积比为1∶1.25∶0.75。

本发明步骤(3)中，浸膏状物加入一定极性溶剂会析出一些鞣质类杂质。

本发明获得的总香豆素类化合物溶液经过HPLC检测三种香豆素类化合物的总含量可达96％，所述的三种香豆素类化合物分别为6-甲基-7-甲氧基香豆素，6，7-二甲氧基香豆素和6，7，8-三甲氧基香豆素。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

(1)本发明首次从柳叶腊梅中分离得到天然化合物6-甲基-7-甲氧基香豆素、6，7-二甲氧基香豆素和6，7，8-三甲氧基香豆素，填补了目前柳叶腊梅中主要香豆素类化合物提取分离的空白。

(2)本发明利用的超声萃取技术相对于传统的分离方法具有分离效果好、污染小、提取率高、产品纯度高、时间短、操作方便等优点。本发明条件固定，易于重复，从而可以进行工业化生产。