[发明专利]蕲山药组培育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蕲山药组培育苗方法，通过植物组织培养技术实现蕲山药种苗的规模化生产。属应用生物学、农业生物技术领域。

技术背景

山药为薯蓣科薯蓣属植物(Dioscorea spp.)块根的俗称，是传统的药食同源型经济作物，在我国已有2000多年的种植历史。我国栽培的山药主要有家山药和田薯两大类。家山药块根较小，分布不广，除蔬菜食用外，常作药用；田薯分布较广，多数品种属本种，主供蔬菜食用。蕲山药(Dioscoreae Oppositae“Qi”)属家山药种，是以医圣李时珍故里湖北省蕲春县为原产地的鄂东地区大面积种植的的地方山药良种。按块根形态，蕲山药分为三种类型，即佛手型、短棒型和马蹄型。因蕲山药部分品种的块根形似佛手，农户俗称蕲山药称为佛手山药。当地独特的土壤气候条件，孕育了蕲山药枝肥个大、肉质细腻、色白汁多、淀粉丰富、口感好的特质，蕲山药“益肾气、健脾胃、止泻痢、化痰涎、润皮毛”之功效，为《本草纲目》所推崇，历为鄂东名产。

目前，直接播种块根是生产上蕲山药常用的繁殖方法，这种传统的种植习惯，已经不能适应蕲山药优质丰产和产业化的需要，主要表现在三个方面：1)用种量大，成本较高。蕲山药种薯使用量为2,250～3,000kg/hm²，按批发价6元/kg计算，费用为13,500～18,000元/hm²。2)不利于种性的保持。出于销售和经济效益的考虑，农户习惯于将个头大、卖相好的薯块作为商品出售，而将个头小、长相不好的留作种薯，这种不科学的留种方法使得蕲山药的种性出现退化，块根形状变异。3)不利于集约化生产。由于种薯个体的差异，常导致种薯发芽或出苗的时间不相一致，成熟的时间也存在差异，给蕲山药的生产管理和采收加工带来难度。为了解决上述难题，人们曾尝试用蕲山药单茎节叶插条繁殖，进行良种育苗，但由于存在生根困难、成活率低，以及不能大规模快速繁殖整齐一致的苗木等原因，无法在生产实际中得到应用。

植物的组织培养是根据植物细胞全能性理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。由于植物组织培养具有占用空间小、不受地区、季节限制，培养周期短、可短时间大量繁殖，不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征，以及投资少，经济效益高等优势，该技术一经问世，便迅速在花卉、农作物和林木种苗生产上得到广泛应用，表现出强大的生命力。因此，借助植物的组织培养技术，建立蕲山药组培育苗方法，规模化生产蕲山药种苗，以满足蕲山药的优质丰产和产业化需要是可以实现的。

发明内容

本发明的目的是为蕲山药种苗的规模化生产提供一种结果稳定可靠的组培育苗方法，利用该方法培育蕲山药种苗具有遗传稳定性好、成本低廉、育苗周期短、繁殖系数高、操作简便的特征。

实现本发明目的的蕲山药组培育苗方法，其特征是：以蕲山药的离体器官为外植体，通过组织培养方法，培育蕲山药种苗。

本发明的蕲山药组培育苗方法，包括外植体选择与消毒、愈伤组织诱导、不定芽分化、生根培养和试管苗移栽步骤：以盆栽蕲山药的带节茎段为外植体，经体积浓度70％酒精和2wt％次氯酸钠依次消毒后，在MS+NAA+BA培养基上进行愈伤组织诱导、不定芽分化和生根培养，生根苗移栽到混合基质中培育，所述的混合基质质量比组成为菜园土∶山沙∶泥炭＝4∶1∶1。

所述的蕲山药缓培种苗方法的步骤为：

步骤1、选择外植体：选择蕲山药组织器官为外植体，经消毒剂处理后用于接种；

步骤2、愈伤组织诱导：将步骤1选择的外植体，接种于愈伤组织诱导培养基上，诱导产生愈伤组织；

步骤3、愈伤组织分化不定芽：将步骤2产生的愈伤组织，接种于愈伤组织分化培养基上，诱导产生不定芽；

步骤4、生根培养：将步骤4培养的不定芽，接种于生根培养基上，培养生根苗；

步骤5、生根苗移栽：将步骤5产生的生根苗，进行炼苗后移栽至种植盆内，培养容器苗。

本发明的蕲山药种苗的组培快繁方法所需试验材料及仪器设备：

植物材料：蕲山药(Dioscoreae Oppositae“Qi”)块根；

化学试剂：(1)生长素：NAA(α-Naphthaleneacetic，α-萘乙酸，由Phytechnology Laboratories，LLC生产)；(2)细胞分裂素：BA(Benzy Laminopurine，由Phytechnology Laboratories，LLC生产)；(3)MS培养基；