[发明专利]一种检测麻疹病毒抗体的试剂装置及其方法

说明书

技术领域

本发明申请涉及一种检测麻疹病毒抗体的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测技术领域。

背景技术

麻疹是儿童最常见的急性呼吸道传染病之一，其传染性很强，在人口密集而未普种疫苗的地区易发生流行，约2～3年发生一次大流行。临床上可出现发热、上呼吸道炎症、眼结膜炎等症状，而以皮肤出现红色斑丘疹和颊粘膜上有麻疹粘膜斑及疹退后遗留色素沉着伴糠麸样脱屑为主要特征。

麻疹病毒属副粘病毒科，为单股负链RNA病毒，与其它的副粘病毒不同之处为无特殊的神经氨酸酶。麻疹病毒电镜下呈球形，直径约100～250nm，衣壳外有囊膜，囊膜有血凝素(HL)，有溶血作用。麻疹病毒有6种结构蛋白；在前驱期和出疹期内，可在鼻分泌物、血和尿中分离到麻疹病毒。在人胚胎或猴肾组织中培养5～10天时，细胞出现病理改变，可见多核巨细胞伴核内嗜酸性包涵体。此病毒抵抗力不强，对干燥、日光、高温均敏感，紫外线、过氧乙酸、甲醛、乳酸和乙醚等对麻疹病毒均有杀灭作用，但在低温中能长期保存。

麻疹病毒抗体的检测是判断是否感染了麻疹病毒的一项参考指标。麻疹病毒的IgM抗体可在发病早期出现，10天左右达到高峰，30～60天后消失。而IgG抗体与IgM抗体同时或较晚出现，6个月内明显下降，以后维持在一定水平并终生存在。

临床检测麻疹病毒抗体的常见方法包括金标法、间接免疫荧光法酶联免疫吸附试验的方法，但这些方法都存在着不足之处。

一、金标法

金标法是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，胶体金已经广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

该方法快速、敏感性高，但其特异性差，假阳性率较高，且只能做定性检测，不能定量。

二、间接免疫荧光法

该法的基本原理是用特异性的抗体与载玻片中的抗原结合后形成抗原抗体复合物，继用荧光抗体与抗原抗体复合物结合，形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下，根据复合物的发光情况来确定所检测的抗体。该方法由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗体增多，发出的荧光亮度强，因而其敏感性强。但是其不足也是明显的：

(1)在分析结果时无法根据分子量的大小区分非特异性识别；

(2)操作相对复杂，需要价格较昂贵的荧光显微镜，在很多基层医院难以推广，也不太适用于标本量较多的实验室；

(3)荧光测定中的本底较高，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难；

(4)结果判定需要有经验的专业人员，分析结果的客观性不足；

(5)只能进行定性检测，不能进行定量检测。

三、酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测麻疹病毒抗体，但该方法也存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

发明内容

本发明专利申请即是针对目前对于麻疹病毒抗体的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。