[发明专利]一种溶菌酶制剂、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明属于酶学和药物制剂学领域，涉及一种溶菌酶制剂、其制备方法及用途。

背景技术

近年来，大量的眼科药物制剂的临床数据和研究资料表明，在眼部疾病的治疗过程中产生的副作用或不良反应有很多时候都是由于抑菌剂造成的。例如，眼部手术后使用药物进行术后治疗时，由于抑菌剂的影响而造成的角膜上皮细胞脱落等现象时有发生。并且，随着电脑、空调等的普及，干眼症患者人群也在不断增加，这类患者的治疗往往需要长期辅以人工泪液，而化学抑菌剂的长期使用会造成不同程度的角膜损伤。

因此，眼用制剂中的抑菌剂带来的副作用已成为社会普遍关注的问题，也是目前全球眼科药物开发研究的热点。现有技术中采用多种方法来避免抑菌剂对眼部带来的伤害，如制成不含抑菌剂的眼科单剂量产品：如日本参天公司的可乐必妥滴眼液；也可以使用除菌的眼用制剂容器如：日本点眼剂研究所开发的乌诺前列酮异丙酯滴眼液。但这些包装方面的改善并不能保证完全无菌，且成本高，对于长期使用的人群来说，无疑会增加患者的经济负担。

也有人尝试过在喹诺酮类滴眼液中不加抑菌剂，直接依靠药物的抗菌作用维持制剂的无菌状态。但由于喹诺酮类药物的抗菌谱及抑菌效力有限，其抑菌效果也不尽理想，不具备普遍应用性。

溶菌酶(Lysozyme)是分子量为14.4kDa的酶类，1922年Alexander Fleming在寻找抗生素的过程中发现了溶菌酶。作为人体自身的抗感染天然屏障之一，它能够通过催化肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基间和壳糊精中N-乙酰葡糖胺残基间的1，4-β链的水解，而破坏细菌的细胞壁，达到杀死细菌的目的，因此可以作为抑菌剂，已经在食物领域中得到应用。溶菌酶作为酶类具高效性，其抗菌活性为同类化学物质的几十倍甚至上千倍；且作为人体固有活性物质，对人体无任何副作用，可应用于各类人群。除此之外，溶菌酶成本低廉、获取途经多、来源广阔，在蛋清、乳汁中都含有大量的溶菌酶，特别是近年来随着克隆技术的广泛应用，使得微生物提取溶菌酶也成为溶菌酶大量生产的一大途径。

然而，溶菌酶在水中的稳定性较差，不能长时间保存。并且眼用制剂大多是水溶性制剂，因此溶菌酶应用于眼用制剂受到一定限制。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，获得了一种溶菌酶制剂。本发明人惊奇地发现，该溶菌酶制剂能够用于眼用制剂，并且溶菌酶在本发明的体系(包括合适的pH和稳定剂盐类浓度)中能够保持良好的稳定性。由此提供了下述发明：

本发明者综合以上问题，寻找到一种对眼部安全、无刺激且高效的抑菌剂——溶菌酶，该抑菌剂可适用于各类人群，且成本低廉。溶菌酶作为一种眼用制剂的抑菌剂用量范围为0.001％-25％(w/w)，优选范围为0.01％-20％(w/w)，更优选为0.1％-15％(w/w)；进一步优选为0.3％-10％(w/w)，特别优选为0.5％-5％(w/w)。且在与其他抑菌剂联合使用，可以使两种抑菌剂的浓度同时降低，用量减小，降低其他抑菌剂对眼表的损害。

过去虽有人考虑到以其作为眼用制剂的抑菌剂，但由于其在水溶液中的稳定性不佳，使得溶菌酶在此方面的应用未能得到发展。为保证溶菌酶的稳定性，发明人通过大量的实验，处理溶菌酶原料，使获得的精制溶菌酶可在水溶液中保持3-5年稳定，攻克了这个难题。处理工艺如下：

1)将溶菌酶溶于注射用水，得到溶菌酶溶液；

2)向步骤1)中的溶菌酶溶液中加入稳定剂盐类；

3)调节pH至4.6-9.0。

在本发明的一个实施方案中，还包括步骤4)静置，使溶菌酶与稳定剂盐类充分接触后过滤；

在本发明的一个实施方案中，还包括5)加入吸附性物质对溶液中的杂质进行吸附，获得澄清透明的溶液，吸附后过滤除去吸附性物质后备用。

在本发明的一个实施方案中，还包括6)得到的溶液可采用冷冻干燥、喷雾干燥等方式，使其以固体形式保存以备制剂用；亦可调节至等电点后，收集固体，采用真空干燥等方式，收集固体；亦可以液体形式加入其他药物、渗透压调节剂、保湿增稠剂等原辅料直接投料制成眼用制剂，例如滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、眼用固体制剂等剂型。

下面是对上述工艺的详细解释：

发明中所涉及到的眼用制剂的剂型可以为滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、眼用固体制剂等眼科常用的液体、半固体、固体剂型。