[发明专利]无菌鸡全血清的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种无菌鸡全血清的制备方法。

背景技术

作为辅料加入制备副鸡嗜血杆菌或禽多杀巴氏杆菌等细菌的培养基的鸡全血清，主要应用于细菌培养，现市场购买鸡血清，价格高，质量参差不齐，往往影响生产的稳定性和半成品的含菌量。

发明内容

本发明目的在于提供一种营养丰富、价格低廉，可直接应用于细菌培养的无菌鸡全血清的制备方法。

本发明的具体技术方案为：无菌鸡全血清的制备方法，它包括以下步骤：

（1）鸡血用离心机离心，收集滤过液，冻存；

（2）7-10天后取出化冻，用离心机离心后取上清液，冷冻保存；

（3）冻存3－5天后，取出放在温室中将血清化开，进行两次粗滤澄清；

（4）过滤除菌；

（5）室温放置，然后置于37℃环境培养24小时，即得。

无菌鸡全血清的制备方法，优选方案包括以下步骤：

（1）鸡血用管式离心机或立式冷冻离心机离心，用血清瓶收集滤过液，置于-20℃冻存；

（2）7-10天后取出化冻，用小离心机离心后取上清液分装在干净的血清瓶中，置于-20℃冷冻保存；

（3）冻存3－5天后，取出放在温室中将血清化开，先用桶式滤器加孔径为1.5mm的滤板粗滤澄清，提供压力约0.1－0.3MPa；再用同种方法用孔径为0.5mm的滤板粗滤；

（4）然后用灭菌的两层滤板一起过滤除菌；

（5）室温放置一天后，置于37℃环境培养24小时，即得。

无菌鸡全血清的制备方法，最优选方案包括以下步骤：

（1）鸡血用GQ105型管式离心机10000转/分或立式冷冻离心机3000转/分离心15min，用血清瓶收集滤过液，置于-20℃冻存；

（2）7-10天后取出化冻，用小离心机4000转/分离心40min后取上清液分装在干净的血清瓶中，置于-20℃冷冻保存；

（3）冻存3－5天后，取出放在温室中将血清化开，然后用桶式滤器加孔径为1.5mm的滤板粗滤澄清，提供压力约0.1－0.3MPa；再用同种方法用孔径为0.5mm的滤板粗滤；

（4）然后用灭菌的孔径分别为0.5mm和0.2mm两层滤板一起过滤除菌；

（5）室温放置一天后，置于37℃环境培养24小时，即得。

步骤（3）所述压力由气体压缩机提供。

步骤（3）所述桶式滤器为2000ml桶式滤器。

本发明的有益效果为：本发明方法制备的鸡全血清营养丰富，价格低廉，可作为辅料代替成品鸡血清加入制备副鸡嗜血杆菌或禽多杀巴氏杆菌等细菌的培养基，直接应用于细菌培养，用于细菌抗原的批量生产。一方面可提高细菌培养的含菌量，极大的提高半成品的质量，另一方面可极大的降低生产成本。

具体实施方式

实施例：

（1）在屠宰场买鸡血50000ml左右，用GQ105型管式离心机10000转/分或立式冷冻离心机3000转/分离心15min，用血清瓶收集滤过液，置于-20℃冻存；

（2）7-10天后取出化冻，用小离心机4000转/分离心40min后取上清液分装在干净的血清瓶中，置于-20℃冷冻保存；

（3）冻存3－5天后，取出放在温室中将血清化开，然后用2000ml桶式滤器加孔径为1.5mm的滤板粗滤澄清，气体压缩机提供压力约0.1－0.3MPa；再用同种方法用孔径为0.5mm的滤板粗滤；

（4）然后用灭菌的孔径分别为0.5mm和0.2mm两层滤板一起过滤除菌；

（5）室温放置一天后，置于37℃环境培养24小时后，用普通平板或斜面做无菌检验，检验合格后4℃或-20℃保存备用。

使用效果举例：按照实施例方法制备的鸡全血清可作为辅料代替成品鸡血清加入制备副鸡嗜血杆菌或禽多杀巴氏杆菌等细菌的培养基，用于细菌抗原的批量生产。一方面可提高细菌培养的含菌量，另一方面可极大的降低生产成本。 

具体数据列表如下：

细菌种类含菌量生产成本副鸡嗜血杆菌3－4亿CFU/ml提高至6－8亿CFU/ml降低50%禽多杀性巴氏杆菌80-100亿CFU/ml提高至120－150亿CFU/ml降低30%