[发明专利]一种来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株及其制备方法有效
申请号: | 201110457386.5 | 申请日: | 2011-12-31 |
公开(公告)号: | CN102424816A | 公开(公告)日: | 2012-04-25 |
发明(设计)人: | 何建行;李慧灵 | 申请(专利权)人: | 广州呼吸疾病研究所;何建行;李慧灵 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫 |
地址: | 510120 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 来源于 细胞 肺癌 化疗 复发 病灶 细胞株 及其 制备 方法 | ||
1.一种来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株,其特征在于,命名为人小细胞肺癌细胞株0225-11Scac,保藏号为CCTCC NO:C201025。
2.如权利要求1所述的来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株,其特征在于,所述细胞株在倒置显微镜下观察细胞体积小,核大,胞浆少,细胞与平皿之间贴附生长,贴附不紧密,细胞可成团半悬浮生长。
3.如权利要求1所述的来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株,其特征在于,所述细胞株的体外倍增时间为30.75h。
4.如权利要求1所述的来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株,其特征在于,所述细胞株的蛋白表达特征为NSE阳性表达。
5.一种来源于人小细胞肺癌放化疗后复发病灶的细胞株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)组织块机械解离:将切除的人小细胞肺癌放化疗后复发病灶组织解离,清洗去除杂质,分离肺癌实质组织,去除正常肺泡及支气管组织和间质组织后,得到剩余的组织;
(2)胶原酶消化:将步骤(1)得到的剩余的组织切成组织片,清洗,然后向组织片加入胶原酶,孵育,过滤,然后收集肿瘤细胞,进行接种培养,得到存活细胞;
(3)对步骤(2)得到的存活细胞进行纯化,去除纤维细胞等杂质,纯化后的肺癌细胞连续培养并传代大于12个月,即得细胞株。
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