[发明专利]白鹃梅的组织培养方法

权利要求书

1.白鹃梅的组织培养方法，包括以下步骤：

1）3-4月间从白鹃梅的地栽苗中选取生长健壮、无病虫害的植株，采集幼嫩的茎段，去除叶片，清水冲洗后作为外植体备用；

2）将清洗干净的外植体用升汞溶液浸泡消毒，并用无菌水冲洗；

3）将消毒处理好的外植体切成小段接入芽诱导培养基中；

4）培养一段时间后，腋芽不断萌发、生长，形成不定芽，将不定芽分离切割转接入增殖培养基中培养；

5）培养一段时间后，将不定芽生长形成的丛芽切下，经生根培养基培养后，形成健壮的组培生根苗。

2.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤1）中：采集幼嫩的茎段前半个月保证天气晴朗，在晴天的上午，采集幼嫩的茎段，去除叶片，保留腋芽，流水冲洗10-30min后作为外植体备用。

3.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤1）中：采集嫩茎前半个月如遇雨则对植株采取避雨措施，然后在晴天的上午，采集幼嫩的茎段，去除叶片，保留腋芽，流水冲洗10-30min作为外植体备用。

4.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤2）中：在超净工作台上操作，将清洗干净的外植体用升汞溶液浸泡消毒，其中升汞溶液的浓度为0.08%-0.12%，浸泡时间为8-10min，期间不断摇动，倒掉升汞溶液用无菌水冲洗4-6次。

5.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤3）中：外植体经消毒后用无菌滤纸吸干表面水分，用无菌镊子小心夹住，用无菌刀片切成1cm大小带节间的茎段，接入无菌的芽诱导培养基中；所述的芽诱导培养基的配方为：MS培养基中添加0.5-1.5mg·L^-1 6-BA、3%蔗糖和0.54%琼脂，pH 5.2-5.6。

6.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤4）中：在芽诱导培养基中的培养温度为25±1℃，光照时间为11-13h，光强1800-2200Lx，茎段接入培养基22-24d后，腋芽萌发生长出丛生芽，并进一步生长成幼嫩植株的上半部分，将1.5cm左右的丛芽采取芽间分离的方式分成单独的嫩枝，转接入增殖培养基；所述的增殖培养基的配方为：MS培养基中添加0.5-1.5mg·L^-1 6-BA、3%蔗糖和0.54%琼脂配成，pH为5.2-5.6。

7.根据权利要求1所述的白鹃梅的组织培养方法，其特征在于步骤5）中：在增殖培养基中培养22-24d，基部再生出丛芽，将长度超过2.5cm的嫩枝从芽丛上分离，接入生根培养基；所述的生根培养基的配方为：MS培养基中添加0.2-0.4mg·L^-1 NAA、3%蔗糖和0.54%琼脂，pH5.2-5.6。