[发明专利]核酸转运用载体组合物

说明书

本申请是申请日为2006年10月17日、申请号为200680038954.5(国际申请号为PCT/JP2006/320617)、发明名称为“核酸转运用载体组合物”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种在将核酸给予来自动物的细胞或生物时能够保护核酸不被分解并将其高效率地转运至细胞内的、低毒性且安全性高的核酸转运用载体组合物、及核酸转运用组合物。

背景技术

近年，随着生物技术的发展，已经发现了多种在细胞内发挥生理活性功能的核酸。例如，已知siRNA(small interfering RNA：小干扰RNA)可引起存在于细胞内的靶基因的mRNA分解，阻碍靶基因表达(RNA interference：RNA干涉)。由此RNA干涉产生的阻碍靶基因表达的功能导致特定基因或基因组的异常表达，在减轻所患疾病症状乃至治疗方面是有用的，故人们期待将siRNA开发用作治疗药。但是，为了将以siRNA为首的核酸用作治疗药等，重要的是使siRNA在靶细胞内发挥功能，因此，确立使核酸有效地转运至靶细胞内的技术必不可少。

作为将外来性核酸分子或基因转运至细胞内的技术，包括逆转录病毒、腺病毒及疱疹病毒等在内的多种病毒被用于人难治性疾病的治疗。但是，由于存在感染性、免疫反应性、生产率等问题，在治疗中有难度。因此，人们正在开发一种能克服来自病毒的问题、且可用于将核酸分子转运至细胞内的非病毒性载体。

目前为止，作为促进siRNA等核酸向细胞内转运的非病毒性核酸转运用载体，例如，专利文献1中公开了特定结构的阳离子性脂质。但是，专利文献1中公开的阳离子性脂质，具有在给予培养细胞或生物体时呈现毒性的缺点。另外，专利文献2中，作为毒性较低、可将siRNA转运至细胞内的载体组合物，公开了含有两亲性化合物及聚阳离子的组合物。但是，即使是专利文献2中公开的组合物，在将充分量的siRNA导入细胞内时，其对细胞的毒性方面依然存在问题。

以上述现有技术为背景，人们期待开发出低毒性、能够使以siRNA为代表的核酸高效率地转运到细胞内的核酸转运用载体组合物。

专利文献1：特表2002-529439号公报

专利文献2：特表2005-508394号公报

发明内容

因此，本发明的目的在于解决上述现有技术中存在的问题。具体而言，本发明的目的在于提供一种在将siRNA等核酸给予来自动物的细胞或生物时能够保护核酸不被分解并将其高效率地转运至细胞内的、低毒性且高安全性的核酸转运用载体组合物、及含有该载体组合物和核酸的核酸转运用组合物。

本发明人等为了解决上述问题进行了潜心研究，发现组合含有(A)具有甾核的阳离子性脂质、及(B)季铵盐型的阳离子性脂质的组合物，毒性低且能够保护核酸不被分解并使其高效率地转运至细胞内，作为核酸转运用载体是有用的。本发明是基于上述发现，通过进一步反复研究而完成的。

即，本发明提供下述方案的发明：

项1.一种核酸转运用载体组合物，其特征在于，含有(A)具有甾核的阳离子性脂质、及(B)季铵盐型的阳离子性脂质。

项2.如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中还含有(C)油性基材。

项3.如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，(A)成分为3β-[N-(N’，N’-二甲基氨基乙烷)-氨基甲酰基]胆固醇、及/或3β-[N’，N’，N’-三甲基氨基乙烷]碘化胆固醇。

项4.如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，(B)成分为选自二甲基二(十八烷基)溴化铵盐、二油酰基三甲基铵丙烷、及N-(1-(2，3-双(油酰氧基)丙基)-N，N，N-三甲基铵盐酸盐中的至少1种。

项5.如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，相对于100重量份(A)成分，以10～200重量份的比例含有(B)成分。

项6.如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，所述组合物为siRNA转运用载体。

项7.一种核酸转运用组合物，其中含有核酸及项1至5中任一项所述的核酸转运用载体组合物。

项8.如项7所述的核酸转运用组合物，其中，核酸为siRNA。

项9.一种核酸导入方法，其特征在于，通过使项7所述的核酸转运用组合物与细胞接触，使核酸导入到细胞内。

项10.(A)具有甾核的阳离子性脂质及(B)季铵盐型的阳离子性脂质的组合在制造核酸转运用载体组合物中的用途。